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人正常組織來(lái)源細(xì)胞培養(yǎng)法

閱讀:230          發(fā)布時(shí)間:2017-7-5

人正常組織來(lái)源細(xì)胞培養(yǎng)法與一般培養(yǎng)相同,關(guān)鍵在于傳代,其傳代程序?yàn)椋?/p>

1.      吸除舊培養(yǎng)液注入另瓶中。

2.      用溫BSS沖洗1次。

3.      用0.25%溫胰蛋白酶消化,加入消化液量以僅覆蓋細(xì)胞層即可;作用1~5分鐘。

4.      待細(xì)胞附著松動(dòng)、人正常組織來(lái)源細(xì)胞胞質(zhì)邊緣卷起和間隔加大,便終止消化。為防止細(xì)胞丟失,可不必再用BSS沖洗,直接向瓶中加入培養(yǎng)液(新舊培養(yǎng)液按2:1新舊混合)。

5.      輕輕反復(fù)吹打制成單個(gè)細(xì)胞懸液。

6.      人正常組織來(lái)源細(xì)胞按一分為二比例接種培養(yǎng)。

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