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人正常組織來源細(xì)胞傳代實(shí)驗(yàn)時(shí)操作步驟

閱讀:245          發(fā)布時(shí)間:2017-5-16

1.人正常組織來源細(xì)胞無(wú)菌室之前用肥皂洗手,用75%酒精擦拭雙手,進(jìn)行消毒。
2.倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),確定細(xì)胞是否需要傳代及細(xì)胞需要稀釋的倍數(shù),將培養(yǎng)用液置37℃下預(yù)熱。
3.超凈臺(tái)臺(tái)面應(yīng)整潔無(wú)污漬,用0.1%新潔爾滅溶液擦凈。
4.打開超凈臺(tái)的紫外燈照射臺(tái)面20min左右,關(guān)閉超凈臺(tái)的紫外燈,打開抽風(fēng)機(jī)清潔空氣,除去臭氧。
5.點(diǎn)燃酒精燈;取出無(wú)菌試管,吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過酒精燈火焰略燒后插在無(wú)菌試管內(nèi)。
6.將培養(yǎng)用液瓶口用75%酒精消毒,過酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上。
7.倒掉培養(yǎng)人正常組織來源細(xì)胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用2—3mLHanks液洗去殘留的舊培養(yǎng)基,或用少量胰酶涮洗一下。
8.每個(gè)大培養(yǎng)瓶加入1mL胰酶,小瓶用量酌減,蓋好瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察,當(dāng)細(xì)胞收回突起變圓時(shí)立即翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶,使細(xì)胞脫離胰酶,然后將胰酶倒掉。注意勿使細(xì)胞提早脫落入消化液中。
9.加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基,反復(fù)吹打消化好的細(xì)胞使其脫壁并分散,再根據(jù)分傳瓶數(shù)補(bǔ)加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基制成細(xì)胞懸液,然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋上瓶蓋,適度擰緊后再稍回轉(zhuǎn),以利于CO2氣體的進(jìn)入,將培養(yǎng)瓶放回CO2培養(yǎng)箱。
10.對(duì)懸浮培養(yǎng)人正常組織來源細(xì)胞,可將細(xì)胞懸液進(jìn)行離心去除舊培養(yǎng)基上清,加入新鮮培養(yǎng)基,然后分裝到各瓶中。
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人抗載脂蛋白抗體A1(Apo A1)ELISA試劑盒     *    英文名稱:    Human anti-apolipoprotein A1 antibody,Apo A1 ELISA Kit    規(guī)格:    96T/48T
人抗胰島素受體抗體(AIRA)ELISA試劑盒     進(jìn)口/分裝    英文名稱:    Human anti-insulin receptor antibody,AIRA ELISA Kit    規(guī)格:    96T/48T
人抗中性粒/中心體抗體(ACA)ELISA試劑盒     進(jìn)口/原裝    英文名稱:    Human anti-centrol and centrosome antibody,ACA ELISA Kit    規(guī)格:    96T/48T
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人抗核周因子抗體(APF)ELISA試劑盒    進(jìn)口/分裝    英文名稱:    Human anti-perinuclear factor,APF ELISA Kit    規(guī)格:    96T/48T
人抗肌動(dòng)蛋白抗體(AAA)ELISA試劑盒    進(jìn)口/原裝    英文名稱:    Human anti-Actin antibody,AAA ELISA Kit    規(guī)格:    96T/48T
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人抗糖蛋白抗體(GP)ELISA試劑盒    *    英文名稱:    Human anti-glycoprotein antibody,GP ELISA Kit    規(guī)格:    96T/48T
人抗單核細(xì)胞抗體(AMA)ELISA試劑盒    進(jìn)口/分裝    英文名稱:    Human anti-Monocyte antibody,AMA ELISA Kit    規(guī)格:    96T/48T
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