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人正常組織來源細(xì)胞瞬時轉(zhuǎn)染流程

閱讀:198          發(fā)布時間:2018-4-18

原理:
人正常組織來源細(xì)胞通過 脂質(zhì) 體介導(dǎo)轉(zhuǎn)染法及電穿孔等基因轉(zhuǎn)染技術(shù),將靶基因?qū)爰?xì)胞,一般在轉(zhuǎn)染后48小時左右,靶基因即可在細(xì)胞內(nèi)表達(dá)。根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?8小時后即可進(jìn)行靶 基因表達(dá) 的檢測等實(shí)驗(yàn)。
應(yīng)用:
觀察目的基因及其表達(dá)蛋白在某種細(xì)胞中的功能(短時間即可進(jìn)行觀察,但效應(yīng)會很快丟失)。
一般流程:
1)細(xì)胞接種:轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)前天接種細(xì)胞,各種細(xì)胞的平板密度依據(jù)各種細(xì)胞的生長率和細(xì)胞形狀而定。進(jìn)行轉(zhuǎn)染當(dāng)天細(xì)胞密度應(yīng)達(dá)到60%~80%覆蓋。
2)細(xì)胞轉(zhuǎn)染(脂質(zhì)體、電穿孔、FuGENE6等)
3)48小時以后鑒定目的基因的表達(dá)情況。
人正常組織來源細(xì)胞前期準(zhǔn)備:
構(gòu)建好的外源基因載體,或目的基因基本信息。
待轉(zhuǎn)染的細(xì)胞系(1×106個細(xì)胞,可傳代,倍增時間小于48小時)以及 細(xì)胞培養(yǎng) 條件的說明。
若需要檢測靶基因的表達(dá),請?zhí)峁┫鄳?yīng) 抗體。
Tartaric Acid     1g    左旋酒石酸標(biāo)準(zhǔn)品    87-69-4 
Taurine     100mg    ?;撬針?biāo)準(zhǔn)品    107-35-7 
Tazobactam     200mg    他唑巴坦酸標(biāo)準(zhǔn)品    89786-04-9 
misartan     150mg    替米沙坦標(biāo)準(zhǔn)品    144701-48-4 
Temozolomide     200mg    替莫唑胺標(biāo)準(zhǔn)品    85622-93-1 
Tenofovir     15mg    泰諾福韋標(biāo)準(zhǔn)品    206184-49-8 
Tenofovir Disoproxil Fumarate     200mg    泰諾福韋酯富馬酸鹽標(biāo)準(zhǔn)品    202138-50-9 
Terazosin Hydrochloride     200mg    鹽酸特拉唑嗪標(biāo)準(zhǔn)品    70024-40-7 
Terbinafine Hydrochloride     200mg    鹽酸特比萘芬標(biāo)準(zhǔn)品    78628-80-5 
Terbutaline Related Compound A    50mg    特布他林相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品    
人正常組織來源細(xì)胞

 

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