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动物细胞组织培养中常见的问题及解决方法

阅读:525          发布时间:2017-5-18
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1.培养试剂的保存:
   血清:-5oC - -20oC 保存,避免反复冻融。
   培养基:  2oC – 8oC避光保存。
   *培养基: 2oC – 8oC避光保存,并在2周内用完。
   尽量缩短血清和培养基见光的时间 
2.培养基中是否应加酚红:
   酚红在培养基中被用来作为pH值的指示剂,中性时为红色,酸性时为黄色,碱性时紫色。研究表明,酚红可以模拟固醇类激素的作用,特别是雌激素。为避免固醇类反应,培养细胞尤其是哺乳类细胞时,应使用不加酚红的培养基。由于酚红干扰检测,一些研究人员在做流式细胞检测时不使用加酚红的培养基。
3.液体培养基中谷氨酰胺使用方法:
   很多细胞生长要求在培养液中添加谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不稳定,应置于-20?C冰冻保存,用前加入培养基中。加有谷氨酰胺的液体培养基4?C 冰箱储存两周以上时,应重新加入原来量的谷氨酰胺。替代L-谷氨酰胺。Glutaplex与L-谷氨酰胺相比更加稳定,降解比较慢,提高细胞的存活和生长,极大降低对细胞有毒性的氨的积累。

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