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技術(shù)文章

人正常組織來源細胞的凍存步驟

閱讀:420          發(fā)布時間:2017-8-1

人正常組織來源細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。下面我們就來介紹一下細胞凍存的步驟:1.選對數(shù)增生期細胞,在凍存前1d換液。 
2.按常規(guī)方法把培養(yǎng)細胞制備成懸液,計數(shù),使細胞密度達5×10 7 /ml左右密度,離心,去上清。 
3.加入配制好的凍存液,按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。凍存細胞時培養(yǎng)液中加入保護劑10%二甲基亞砜或甘油,可使冰點降低,使細胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細胞外。 
4.分裝于無菌凍存管中,每管加1.5m懸液。 
5.旋好凍存管并仔細檢查,一定要蓋緊,做好標(biāo)記。 
6.凍存:在特殊的 儀器 或簡易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min時間內(nèi),下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。人正常組織來源細胞要適當(dāng)掌握下降冷凍速度,過快能影響細胞內(nèi)水分透出,太慢則促進冰晶形成。 
PMP-22(Peripheral Myelin Protein)  外周髓鞘蛋白-22多肽    *    規(guī)格:     0.5mg
PI3K  磷脂酰肌醇激酶(抗原)    進口/國產(chǎn)    規(guī)格:     0.5mg
BMP4(bone morphogenetic protein 4)  骨形態(tài)發(fā)生蛋白4(抗原)    現(xiàn)貨供應(yīng)    規(guī)格:     0.5mg
PLGF (Placenta growth factor)  小鼠胎盤生長因子(多肽抗原)    *    規(guī)格:     0.5mg
PLGF (Placenta growth factor)  胎盤生長因子(多肽抗原)    進口/國產(chǎn)    規(guī)格:     0.5mg
人正常組織來源細胞

 

 

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