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SGCα, 肌糖αELISA试剂盒检测方法

2018-2-23  阅读(1796)

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供应 SGCα, 肌糖αELISA检测试剂盒

 

试剂盒名称 肌糖αELISA检测试剂盒
 
规格 48T/96T
品牌 RENJIEBIO
检测方法 ELISA酶联免疫法
检测波长 450nm
样本 血清、血浆、细胞上清液等
样本体积 50~100ul
研究领域 神经生物学、新陈代谢、免疫学等
使用范围 仅用于科研实验
保存 2~8℃,避光保存

 

 

肌糖αELISA检测试剂盒操作流程如下:
(1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl?!?br />(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。 
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min?!?br />(6)洗板,同(4)?!?br />(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl?!?br />(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min?!?br />(9)洗板,同(4)?!?br />(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min?!?br />(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应?!?br />(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,zui终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。

肌糖αELISA检测试剂盒标准曲线计算

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