人原代角膜内皮细胞专用培养基公司正在出售的产品：人心肌细胞裂解物HCML 大鼠嗜碱性粒细胞性白血病细胞;RBL-2H3 肝癌细胞，BEL-7404细胞 CEL细胞，鸡胚原代肝细胞 小鼠骨髓瘤细胞;Sp2/0-Ag14 CTLL-2(小鼠T细胞) 人结膜成纤维细胞HConF HELF 人原代CIK细胞培养基 小鼠原代膀胱间质细胞培养基

商品属性：

人原代角膜内皮细胞培养基由团队精心优化，经过长期测试，本产品可保持人原代角膜内皮细胞优良的生长状态。

本产品中已包含人原代角膜内皮细胞生长所需的各种成分，无需添加任何成分，可直接用于人原代角膜内皮细胞的培养。

 

一、细胞复苏

1.将10ml移液管、移液枪、1ml枪头、50ml离心管、T25培养瓶、酒精灯、废液缸等物品放入超净工作台，紫外灯照射30min后再通风30min；

2.预热培养基；

3.用75%酒精消毒后放入超净工作台；

4.将冻存细胞从液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴锅中快速晃动使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超净工作台；

7.吸取9ml培养基到50ml离心管中；

8.用1ml枪头吸取解冻的细胞悬液于离心管中；

9.1000r/min,离心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超净工作台；

11.吸弃上清液；

12.吸取1ml培养基重悬细胞，将细胞悬液转移到培养瓶内，补加适量培养基，轻轻晃动培养瓶使细胞分布均匀，并做好标记；

13.在显微镜下观察复苏的细胞密度及状态；

14.将细胞放回二氧化碳培养箱中静置培养。

注意事项：

仅限科研用。

培养体系中的一些组分是对人体健康有害的物质，请不要用暴露的皮肤接触培养体系的液体和有培养体系的液体残留的容器内部；这部分有害物质的浓度和危害性都较低，如有接触，立即用自来水冲洗即可。

公司正在出售的产品：

蛋白酶激活受体4(PAR4)重组蛋白 Recombinant Protease Activated Receptor 4 (PAR4)

FETUB Protein Human 重组人 Fetuin-B / FETUB 蛋白 (His 标签)

GREM1重组小鼠 Gremlin 1 / GREM1 蛋白 (His 标签) Protein

TNFRSF10D Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 TRAIL R4 / CD264 / TNFRSF10D 蛋白 (His 标签)

CFL1重组人 CFL1 / N-cofilin 蛋白 (His 标签) Protein

大鼠β位淀粉样前体蛋白裂解酶1(BACE1)试剂盒 ，英文名： BACE1 ELISA Kit

Mouse esogen (E) ELISA Kit 小鼠雌激素(E)试剂盒

ELISA 小鼠神经肽Y(mouse NPY)  进口分装

CLIAKitforIL-13ELISAKIT大鼠白介素13

通用型马铃薯YN病毒(PotatoVirusYN;PVYN)试剂盒20次

ELISAKitANG-2大鼠血管生成素2

五羟色胺 (Serotonin/5-HT)   作用：   ELISA   规格：      进口分装

分泌型白细胞蛋白酶抑制物 (SLPI)   作用：   ELISA   规格：      进口分装

P 物质 (Substance P)   作用：   ELISA   规格：      进口分装

生存素 (survivin)   作用：   ELISA   规格：      进口分装

小鼠凋亡相关因子(FAS/CD95)ELISA 试剂盒

Tacrolimus (FK506) ELISA Kit K506)试剂盒

HumanHerpessimplexvirus,HSV-Ag1ELISAKit 人单疱疹病毒抗原-1(HSV-Ag1)试剂盒 进口分装

HumanArgyrophilicnucleolarorganizerregionproteins,Ag-NORs试剂盒人核仁形成区嗜银蛋白(Ag-NORs)试剂盒

植物源性食品芥麦(Buckwheat)试剂盒20次

Humahymusactivatioegulatedchemokine,TARCELISAKit人活化调节趋化因子(TARC/CCL17)试剂盒

P选择素糖蛋白配体1抗体

戊二酰脱氢酶抗体

人原代角膜内皮细胞专用培养基CD83重组小鼠 CD83 / HB15 蛋白 (His 标签) Protein

A Beta1-40 (mutation type, MT 0.1mgA Beta1-40 (mutation type, MT) peptide 突变型β淀粉样肽1-40

ABHD14B重组人 ABHD14B 蛋白 (His 标签) Protein

FETUB Protein Human 重组人 Fetuin-B / FETUB 蛋白 (His 标签)

IFNG Protein Rat 重组大鼠 IFNG / Interferon Gamma 蛋白

细胞培养步骤：

?细胞复苏?：

从液氮罐中取出冻存细胞，迅速放入37℃水浴中解冻。

解冻后，将细胞转移到含有新鲜培养基的培养皿中，轻轻摇动使细胞均匀分布。

放入37℃、5%CO2的培养箱中培养。

?细胞换液?：

吸除或倒掉培养皿内的旧培养液。

加入PBS缓冲液，轻轻漂洗细胞，以去除悬浮在细胞表面的碎片，重复几次。

加入新的培养基。

?细胞传代?：

当细胞长到80%~90%时，进行传代。

吸除或倒掉瓶内旧培养液，加入PBS缓冲液漂洗。

加入消化液，轻轻摇动使消化液流遍所有细胞表面。

将培养瓶放入37℃培养箱中静止几分钟，观察细胞变化。当细胞间隙增大后，加入含有血清的培养液终止消化。

吹打细胞使其成为悬液，转移到离心管中离心。

弃上清，加入适量的细胞培养液重悬细胞。

按比例分装到新的培养皿中，补加新鲜培养基。

做好标记，放入37℃、5%CO2的培养箱中培养。

?细胞冻存?：

选择对数生长期的细胞进行冻存。

将细胞转移到离心管中离心，弃上清。

加入适量的冻存液（如90%的培养基+10%的DMSO），轻轻吹打重悬细胞。

将细胞转移到冷冻保存管中，标记后放入程序降温盒，再放入-80℃冰箱冻存。几小时后或过夜转至液氮罐保存。