详细介绍
产品属性:
产品名称 | 规格 | 货号 |
小鼠骨细胞 | 5×10?Cells/T25培养瓶 | GOY-01X1319 |
商品介绍:
名称 小鼠骨细胞 2.组织来源:骨组织 3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介: 小鼠骨细胞分离自骨组织;骨组织的细胞成分包括骨原细胞、成骨细胞、骨细胞和破骨细胞。只有骨细胞存在于骨组织内,其他三种细胞均位于骨组织的边缘。骨细胞(Osteocyte)是人体骨骼中最主要的细胞成分。在成年人骨骼中,骨细胞占细胞总数量的90%~95%,大约是成骨细胞数量的20倍。骨细胞生长在骨骼内部的骨基质中。骨细胞的细胞体呈梭形或类圆形,位于基质构成的骨陷窝内。与神经细胞类似,每个骨细胞具有大量向外延伸的突触,而这些突触均位于由骨基质构成的骨小管结构中。通过这些突触,骨细胞能够与骨表面的细胞、周围其它的骨细胞进行“交流"。普遍认为,骨细胞起源于成骨细胞。在骨形成的终末阶段,成骨细胞将可能有3种不同的归宿:分化成为骨细胞、转移至骨表面成为暂不活动的成骨细胞、进入程序死亡过程(凋亡)。骨细胞为扁椭圆形多突起的细胞,核亦扁圆、染色深。胞质弱嗜碱性。电镜下,胞质内有少量溶酶体、线粒体和粗面内质网,高尔基复合体亦不发达。骨细胞夹在相邻两层骨板间或分散排列于骨板内。相邻骨细胞的突起之间有缝隙连接。在骨基质中,骨细胞胞体所占据的椭圆形小腔,称为骨陷窝,其突起所在的空间称骨小管。相邻的骨陷窝借骨小管彼此通连。骨陷窝和骨小管内均含有组织液,骨细胞从中获得养分。 5.方法简介: 实验室分离的小鼠骨细胞采用胶原酶消化法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测: 实验室分离的小鼠骨细胞经骨钙素免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息: 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-M217 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态梭形、多角形 传代特性属于终末分化细胞;属于不增殖细胞群 消化液0.25%胰蛋白酶 培养条件气相:空气,95%;CO2,5% |
冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
大鼠 LAG3 / CD223 / Lymphocyte activation gene 3 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
FAM3C / ILEI 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
ICAM4 / CD242 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
CD3D & CD3E Heterodimer 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
食蟹猴 IL1R1 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
食蟹猴 IL6ST / gp130 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
食蟹猴 CD4 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
食蟹猴 CD80 / B7-1 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
食蟹猴 IL2RA 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
食蟹猴 Transferrin Receptor / TFRC / CD71 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠骨细胞硝酸铜,三水 99.99% metals basis3-乙酸 分析标准品,>99%Anti-Cygb/FITC 荧光素标记球蛋白抗体IgG
铬酸铯 SP3-乙酸 用于植物培养,98%Anti-CYP450/FITC 荧光素标记色素P450单氧化抗体IgG
三氧化二铁 SP3-酸 98%Anti-CYP1A1/FITC 荧光素标记色素P450 1A1抗体IgG
氧化钆 SP3-甲 96%Anti-CYP11A1/P450SCC/FITC 荧光素标记色素P450 11A1抗体IgG
99.99% metals basis-3-甲 97%Anti-CYP1A2/FITC 荧光素标记色素P450 1A2抗体IgG
铁 SP3-乙 96%Anti-C ret/RET /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠指状蛋白RET抗体IgG
氧化镧 SP-2-羧酸 98%Anti-Phospho-Ret (Tyr905) /FITC 荧光素标记化指状蛋白RET抗体IgG
氟化锂 99.99% metals basis-3-羧酸 98%Anti-Phospho-Ret (Tyr1062)/FITC 荧光素标记化指状蛋白RET抗体IgG