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elisa酶聯(lián)免疫試劑盒價格中的試劑－酶的底物
閱讀：192 發(fā)布時間：2018-2-5elisa酶聯(lián)免疫試劑盒價格中的試劑－酶的底物
酶的底物
3.3.1 HRP的底物
HRP催化過氧化物的氧化反應，代表性的過氧化物為H2O2，其反應式如下：
DH2+ H2O2 D+ H2O
上式中，DH2為供氧體，H2O2為受氫體。在ELISA中，DH2一般為無色化合物，經酶作用后成為有色的產物，以便作比色測定。常用的供氫體有鄰苯二胺（O-phenylenediamine, OPD）、四甲基聯(lián)苯胺（3,3\\',5,5\\'-tetramethylbenzidine, TMB）和ABTS[2,2\\'-azino-di-（3- ethylbenziazobine sulfonate-6）]。
OPD氧化后的產物呈橙紅色，用酸終止酶反應后，在492nm處有zui高吸收峰，靈敏度高，比色方便，是HRP結合物zui常用的底物。OPD本身難溶于水，OPD•2HCL為水溶性。曾有報道OPD有致異變性，操作時應予注意。OPD見光易變質，與過氧化氫混合成底物應用液后更不穩(wěn)定，須現配置現用。在盒中，OPD和H2O2一般分成二組分，OPD可制成一定量的粉劑或片劑形式，片劑中含有發(fā)泡助溶劑，使用更為方便。過氧化氫則配入底物緩沖液中，有制成易保存的濃縮液，使用時用蒸餾水稀釋。先進的ELISA盒中則直接配成含保護劑的工作濃度為0.02% H2O2的應用液,只需加入OPD后即可作為底物應用液。
TMB經HRP作用后共產物顯藍色，目視對比鮮明。TMB性質較穩(wěn)定，可配成溶液，只需與H2O2溶液混和即成應用液，可直接作底物使用。另外，TMB又有無致癌性等優(yōu)點，因此在ELISA中應用日趨廣泛。酶反應用HCL或H2SO4終止后，TMB產物由藍色呈黃色，可在比色計中定量，zui適吸收波長為405nm。
ABTS雖不如OPD和TMB敏感，但空白值極低，也為一些盒所采用。
另一種HRP的底物為3-（4-羥基）苯丙酸[3-（4-hydroxy）phenly propionic acid,HPPA]，經HRP作用后，產物顯熒光，可用熒光光度計測量。用于elisa酶聯(lián)免疫試劑盒價格的優(yōu)點為可加寬定量測定的線性范圍。
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HPLC≥98% 重樓皂甙E 20mg/支 Polyphyllin E
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HPLC≥98% 告達亭甙元 20mg/支
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