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技術(shù)文章

小鼠成纖維細胞生長因子4elisa試劑盒樣本實驗前準備步驟

閱讀:189          發(fā)布時間:2020-3-12

小鼠成纖維細胞生長因子4elisa試劑盒樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
1血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右2000-3000轉(zhuǎn)/分。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
2血漿:
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右2000-3000轉(zhuǎn)/分。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
3尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右2000-3000轉(zhuǎn)/分。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
4細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右2000-3000轉(zhuǎn)/分。仔細收集上清。
5培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBSPH7.2-7.4稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右2000-3000轉(zhuǎn)/分。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
6組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBSPH7.4,或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右2000-3000轉(zhuǎn)/分。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
 

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