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美谷分子儀器(上海)有限公司

使用Molecular Devices發(fā)布SoftMax Pro 7軟件進(jìn)行平行線(xiàn)分析和相對(duì)活性評(píng)價(jià)

時(shí)間:2017-5-8 閱讀:1360
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 介紹

在生物實(shí)驗(yàn)中要經(jīng)常要使用到的平行線(xiàn)分析(PLA)方法,當(dāng)無(wú)法直接檢測(cè)一個(gè)生物制品的活性而只能通過(guò)檢測(cè)其產(chǎn)生的效果時(shí),PLA方法通常會(huì)被用來(lái)進(jìn)行效應(yīng)曲線(xiàn)的比較來(lái)獲得此制品的效果(Figure1)。如果對(duì)于兩種物質(zhì)其生物響應(yīng)相似或者在兩種不同的生物環(huán)境中同一種物質(zhì)產(chǎn)生相似的效應(yīng)曲線(xiàn)時(shí),平行線(xiàn)分析法可以被用來(lái)進(jìn)行評(píng)價(jià)。評(píng)價(jià)平行性是計(jì)算化合物或藥物相對(duì)活性的前提,并且在很多生物應(yīng)用中如藥物活性比較、分析物鑒定、交叉反應(yīng)、干擾物質(zhì)、基質(zhì)補(bǔ)償、濃度估算和抑制效應(yīng)等應(yīng)用研究中。

當(dāng)兩條曲線(xiàn)被判定為平行時(shí),其中一條曲線(xiàn)的函數(shù)可以通過(guò)通過(guò)另一條曲線(xiàn)的函數(shù)乘上一個(gè)比例系數(shù)向X軸的左邊或右邊變換獲得:ƒ(x) = ƒ(rx), 其中x是劑量,r是比例系數(shù)或相對(duì)活性。對(duì)于相對(duì)活性,一般將參考品(已知品)的活性設(shè)為1,可以使用一個(gè)比例系數(shù)可以將參考品的曲線(xiàn)變換為測(cè)試品(未知品)曲線(xiàn),那么這比例系數(shù)則被稱(chēng)之為測(cè)試品的相對(duì)活性。這個(gè)方法應(yīng)用于線(xiàn)性擬合的曲線(xiàn)非常合適,因?yàn)榫€(xiàn)性擬合的曲線(xiàn)在整個(gè)濃度范圍內(nèi)的曲線(xiàn)斜率是保持一致的(Figure2)。可是對(duì)于非線(xiàn)性擬合曲線(xiàn)如4-參數(shù)和5-參數(shù)曲線(xiàn),S形的濃度效應(yīng)曲線(xiàn)在整個(gè)測(cè)試濃度范圍內(nèi)具有變?cè)挼男甭手担‵igure1)。

用于評(píng)價(jià)平行性的方法根據(jù)平行性假設(shè)的驗(yàn)證方法不同大致可以分為兩大類(lèi):效應(yīng)比較法和參數(shù)比較法。本文將對(duì)這兩大類(lèi)方法進(jìn)行詳細(xì)解釋和介紹怎樣使用SoftMax® Pro 7軟件進(jìn)行平行性測(cè)試。我們建立了一個(gè)Protocol包括了使用F-檢驗(yàn)進(jìn)行F-檢驗(yàn)概率測(cè)試和使用卡芳-檢驗(yàn)進(jìn)行卡芳概率測(cè)試。另外,對(duì)于參數(shù)比較法,根據(jù)菲勒定理我們也建立了一個(gè)Parallelism Test 的protocol放在SoftMax Pro Protocol的庫(kù)內(nèi)。所有這些方法都可以被用于評(píng)價(jià)線(xiàn)性和非線(xiàn)性擬合曲線(xiàn)。

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