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美谷分子儀器(上海)有限公司

Molecular Devices 使用CloneSelect Imager系統(tǒng)在半固體培養(yǎng)基中進行單克隆驗證

時間:2017-4-25 閱讀:1131
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 簡介

生物藥品審批的監(jiān)管標(biāo)準(zhǔn)一直都在不斷變化。其中用于細胞系單克隆來源的監(jiān)管條例驅(qū)使我們要在生物藥物開發(fā)過程中使用更有效的技術(shù)或方法。許多研究人員通常使用成像系統(tǒng)(如CloneSelect Imager)在液體培養(yǎng)基中驗證單克隆和監(jiān)控細胞的生長。其實,CloneSelect Imager系統(tǒng)也可以在半固體培養(yǎng)基中對細胞進行成像。細胞在半固體培養(yǎng)基中的位置比較固定,使研究人員可以更加準(zhǔn)確地在不同時間點對同一個細胞進行成像。實驗室常規(guī)方法通常使用有限稀釋進行細胞克隆。但是,這種方法使用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞,使追蹤細胞變得比較困難或不夠準(zhǔn)確。因為在處理微孔板的過程中,懸浮細胞容易在孔內(nèi)發(fā)生位置移動(Figure1)。不能確保不同時間點成像的 是同一個細胞,從而大大降低單克隆驗證的準(zhǔn)確性。此外,有限稀釋有可能在一個孔內(nèi)加入多個細胞,需要進行額外多次亞克隆來提高單克隆的概率。使用半固體培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞給科研人員提供了一個更快更簡單的克隆方法,而且有利于追蹤細胞的生長。細胞在半固體培養(yǎng)基中的位置相對定,在常規(guī)實驗操作過程中細胞位置不會移動,可以生長成獨立單個的細胞克隆。所以,可以在同一個孔內(nèi)種植多個細胞,而且通過不同時間點成像,能夠清晰追蹤單個細胞的生長情況,提供單克隆的數(shù)字驗證數(shù)據(jù)。CloneSelect Imager為研究人員提供了一個在半固體培養(yǎng)基中對細胞進行成像的方法。這個系統(tǒng)使用非侵入性檢測方法,無需標(biāo)記細胞直接進行成像,可以對細胞生長情況進行準(zhǔn)確定量;進行單細胞來源克隆驗證,確保只選擇穩(wěn)定的單克隆用于下游研究。本文通過實際實驗驗證CloneSelect Imager在CloneMedia™CHO Growth A半固體培養(yǎng)基中對懸浮CHO-s細胞的成能。這種半固體培養(yǎng)基成份經(jīng)過專門優(yōu)化,適合各種CHO細胞系的生長。

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