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Molecular Devices 使用CloneSelect Imager系統(tǒng)在半固體培養(yǎng)基中進(jìn)行單克隆驗(yàn)證

時(shí)間:2017-4-25 閱讀:1128
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 簡(jiǎn)介

生物藥品審批的監(jiān)管標(biāo)準(zhǔn)一直都在不斷變化。其中用于細(xì)胞系單克隆來源的監(jiān)管條例驅(qū)使我們要在生物藥物開發(fā)過程中使用更有效的技術(shù)或方法。許多研究人員通常使用成像系統(tǒng)(如CloneSelect Imager)在液體培養(yǎng)基中驗(yàn)證單克隆和監(jiān)控細(xì)胞的生長。其實(shí),CloneSelect Imager系統(tǒng)也可以在半固體培養(yǎng)基中對(duì)細(xì)胞進(jìn)行成像。細(xì)胞在半固體培養(yǎng)基中的位置比較固定,使研究人員可以更加準(zhǔn)確地在不同時(shí)間點(diǎn)對(duì)同一個(gè)細(xì)胞進(jìn)行成像。實(shí)驗(yàn)室常規(guī)方法通常使用有限稀釋進(jìn)行細(xì)胞克隆。但是,這種方法使用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞,使追蹤細(xì)胞變得比較困難或不夠準(zhǔn)確。因?yàn)樵谔幚砦⒖装宓倪^程中,懸浮細(xì)胞容易在孔內(nèi)發(fā)生位置移動(dòng)(Figure1)。不能確保不同時(shí)間點(diǎn)成像的 是同一個(gè)細(xì)胞,從而大大降低單克隆驗(yàn)證的準(zhǔn)確性。此外,有限稀釋有可能在一個(gè)孔內(nèi)加入多個(gè)細(xì)胞,需要進(jìn)行額外多次亞克隆來提高單克隆的概率。使用半固體培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞給科研人員提供了一個(gè)更快更簡(jiǎn)單的克隆方法,而且有利于追蹤細(xì)胞的生長。細(xì)胞在半固體培養(yǎng)基中的位置相對(duì)定,在常規(guī)實(shí)驗(yàn)操作過程中細(xì)胞位置不會(huì)移動(dòng),可以生長成獨(dú)立單個(gè)的細(xì)胞克隆。所以,可以在同一個(gè)孔內(nèi)種植多個(gè)細(xì)胞,而且通過不同時(shí)間點(diǎn)成像,能夠清晰追蹤單個(gè)細(xì)胞的生長情況,提供單克隆的數(shù)字驗(yàn)證數(shù)據(jù)。CloneSelect Imager為研究人員提供了一個(gè)在半固體培養(yǎng)基中對(duì)細(xì)胞進(jìn)行成像的方法。這個(gè)系統(tǒng)使用非侵入性檢測(cè)方法,無需標(biāo)記細(xì)胞直接進(jìn)行成像,可以對(duì)細(xì)胞生長情況進(jìn)行準(zhǔn)確定量;進(jìn)行單細(xì)胞來源克隆驗(yàn)證,確保只選擇穩(wěn)定的單克隆用于下游研究。本文通過實(shí)際實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證CloneSelect Imager在CloneMedia™CHO Growth A半固體培養(yǎng)基中對(duì)懸浮CHO-s細(xì)胞的成能。這種半固體培養(yǎng)基成份經(jīng)過專門優(yōu)化,適合各種CHO細(xì)胞系的生長。

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