在多重?zé)晒饷庖呓M化(mIHC)實驗中，你是否遇到過這些問題：目標(biāo)抗原信號弱、背景雜光多、甚至組織脫片？這些“翻車現(xiàn)場”的背后，很可能是因為抗原修復(fù)液沒選對！今天，我們就來揭秘不同抗原修復(fù)液的區(qū)別，助你輕松避開實驗“深坑”！
一、為什么抗原修復(fù)液如此重要？
甲醛固定后的組織樣本中，抗原表位常被遮蔽，導(dǎo)致抗體無法結(jié)合。抗原修復(fù)液的作用就是通過特定pH和成分，“撕開”抗原的“保護(hù)罩”，讓目標(biāo)信號清晰顯現(xiàn)。 但不同抗原的“藏身位置”不同（細(xì)胞核、細(xì)胞膜或細(xì)胞質(zhì)），修復(fù)液的選擇直接影響信號強(qiáng)度、特異性，甚至決定實驗成?。?/span>
二、4類常用修復(fù)液，到底怎么選？
1、檸檬酸緩沖液(pH6.0)
適用場景：細(xì)胞膜/細(xì)胞質(zhì)抗原（如CK19）；
缺點：對核抗原（ER、PR等）修復(fù)能力弱，高溫易導(dǎo)致脫片；
避坑提示：若用于核抗原，可能出現(xiàn)“假陰性”或背景雜光！
2、EDTA緩沖液(pH8.0-9.0)
核抗原的“救星” ：如乳腺癌標(biāo)本中的ER、BRCA1，使用EDTA修復(fù)后陽性率顯著提升！
優(yōu)勢：高pH破壞蛋白交聯(lián)更che底，信號強(qiáng)且背景干凈。
3、Tris/Tris-EDTA緩沖液(pH9.0-10.0)
敏感型抗原專用：適合弱表達(dá)抗原，尤其接近生理pH(7.0-7.4)的樣本；
注意：長時間高溫修復(fù)可能損傷組織結(jié)構(gòu)。
4、胰酶法(pH3.5±0.2)
小眾但關(guān)鍵：通過酶解暴露抗原，適合某些特殊表位；
風(fēng)險：過度消化可能破壞組織形態(tài)，需嚴(yán)格控制時間！
三、3個實驗優(yōu)化技巧
1、修復(fù)液會“打架”？每輪染色后必須換！
殘留的修復(fù)液可能干擾下一輪抗體結(jié)合，導(dǎo)致信號交叉污染；
建議：每輪染色后用PBS che底清洗，并更換新鮮修復(fù)液。
2、修復(fù)方式比你想的更關(guān)鍵！
高壓熱修復(fù)：適合耐受高溫的樣本，抗原暴露更che底；
微波修復(fù)：溫和但需反復(fù)優(yōu)化時間，防止局部過熱；
酶解法：適合脆弱組織，但需警惕過度消化；
抗體洗脫液：適合冰凍切片和細(xì)胞爬片的修復(fù)。
3、預(yù)實驗不能省！
同一份樣本可嘗試不同修復(fù)液對比，參考指標(biāo)：
? 目標(biāo)信號強(qiáng)度；
? 背景雜光水平；
? 組織完整性（是否脫片）。
四、總結(jié)：一張表搞定修復(fù)液選擇
| 修復(fù)液類型 | 最佳pH | 適用抗原 | 注意事項 |
| 檸檬酸緩沖液(abs9248) | 6.0 | 膜/漿抗原(CK19) | 核抗原慎用，高溫易脫片 |
| EDTA緩沖液 | 8.0-9.0 | 核抗原(ER、PR) | 信號強(qiáng) |
| Tris-EDTA(abs9342) | 9.0-10.0 | 弱表達(dá)抗原 | 控制修復(fù)時間，避免過消化 |
| 胰酶法 | 3.5±0.2 | 特殊表位抗原 | 嚴(yán)格計時，防止組織碎裂 |
| 抗體洗脫液(abs994) | 6.0 | 所有 | 適合冰凍切片，細(xì)胞爬片 |
Absin產(chǎn)品線：
爆款產(chǎn)品：試劑盒(mIHC、IHC、凋亡、ELISA、ChIP、Co-IP、TR-FRET、生化檢測、殘留檢測、多因子檢測)；細(xì)胞培養(yǎng)(類器官試劑盒+基質(zhì)膠，胎牛血清+培養(yǎng)添加劑+細(xì)胞因子)、分化試劑盒；分子(mRNA合成服務(wù)+提取試劑盒)；化合物大包裝；輔助試劑、耗材/儀器、定制服務(wù)(抗體/多肽/蛋白/標(biāo)記/檢測)...
特色產(chǎn)品：雞胚提取物CEE、B27、N2、霍亂毒素B亞單位CTB、牛腦垂體提取物BPE、百日咳毒素PTX、重組人胰島素Insulin、人源低密度脂蛋白LDL...
(空格分隔,最多3個,單個標(biāo)簽最多10個字符)
9
立即詢價
您提交后，專屬客服將第一時間為您服務(wù)