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淋巴細(xì)胞的分離方法有哪些？

閱讀：5361 發(fā)布時(shí)間：2020-3-10

　　淋巴細(xì)胞分離液是一種用于分離人外周血淋巴細(xì)胞的無菌、低內(nèi)毒素水平的密度梯度分離液。其分離原理是根據(jù)血細(xì)胞的密度差異，通過離心使一定密度的細(xì)胞按相應(yīng)密度梯度分布，從而將淋巴細(xì)胞從人外周血或臍帶血中分離出來。分離純度：使用人淋巴細(xì)胞分離液分離淋巴細(xì)胞的分離純度大于90%。

　　淋巴細(xì)胞分離方法有哪些？主要包括粘附貼壁法，吸附柱過濾法，磁鐵吸引法。

　　一、粘附貼壁法：

　　將已制取的單獨(dú)核細(xì)胞懸浮液傾于玻璃或塑膠培養(yǎng)皿或偏平小瓶中，挪到37℃溫箱浸泡1小時(shí)上下，淋巴細(xì)胞和粒細(xì)胞均貼于平皿內(nèi)壁，而未貼壁的非粘附細(xì)胞基本上為純淋巴細(xì)胞，繼用橡皮刮去貼壁的細(xì)胞即是純單核細(xì)胞群。因細(xì)胞也是貼壁現(xiàn)象，用這樣的方法可以分開的淋巴細(xì)胞群中細(xì)胞進(jìn)而損害。

　　二、吸附柱過濾法：

　　將單獨(dú)核細(xì)胞懸浮液引入配有玻纖或葡聚糖疑膠的柱層中，凡有粘附潛質(zhì)的細(xì)胞絕大多數(shù)被吸咐而黏滯在柱層中，從柱上洗脫下來的細(xì)胞關(guān)鍵是淋巴細(xì)胞。此法行之有效，對(duì)細(xì)胞很少損傷。

　　三、磁鐵吸引法：

　　運(yùn)用單核細(xì)胞具備吞噬的特點(diǎn)，在單獨(dú)核細(xì)胞懸浮液中加直徑為3µm的顆粒，置37℃溫箱里暫時(shí)性轉(zhuǎn)動(dòng)搖晃，待單核細(xì)胞充足吞食顆粒后，用磁石將細(xì)胞吸至管頂，頂層液中含較純的淋巴細(xì)胞。

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