【产品名称】龟分枝杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒
【英文名称】Mycobacterium cheloei
【产品编号】YSP6951
【包装规格】50T
【预期用途】
产品仅用于科研本产品可用于肉及肉制品中鸭源性成分的定性检测，所用仪器为实时荧光PCR仪，可通过实时扩增曲线判断样品中是否存在鸭源性成分。
【检验原理】
本试剂盒采用实时荧光PCR技术，针对鸭源性成分核酸序列设计特异性引物和荧光探针，通过实时荧光一步法RT-PCR（Taqman探针法）对鸭源性成分核酸进行定性检测。
*的扩增性能:
高性能的UNICONTM Taq DNA聚合酶及优化的反应体系保证更高的扩增效率。以相同量的293T细胞cDNA为模板，扩增β-actin基因，与同类产品相比，UNICONTM qPCR Master Mix扩增信号更强，扩增效率更高。
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PCR实验方法步骤：
龟分枝杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。
3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

实验步骤：
典型的PCR由
（1）高温变性模板；
（2）引物与模板退火；
（3）引物沿模板延伸三步反应组成一个循环，通过多次循环反应，使目的DNA得以迅速扩增。其要步骤是：
将待扩增的模板DNA置高温下（通常为93℃-94℃）使其变性解成单链；
人工合成的两个寡核苷酸引物在其合适的复性温度下分别与目的基因两侧的两条单链互补结合，两个引物在模板上结合的位置决定了扩增片段的长短；
耐热的DNA聚合酶（Taq酶）在72℃将单核苷酸从引物的3’端开始掺入，以目的基因为模板从5’→3’方向延伸，合成DNA的新互补链。
99%5g250mgbeta鼠李素994058Cyclic guanosine monophosphate

山柰酚-3-O-芸香糖苷(标准品) 质量规格：HPLC≥98%，标准品 Kaempferol-3-O-rutinoside

Eugenol醇测定用内标对照溶液标准品（睛水溶液）规格：规格：人腺苷环化酶1(ADCY1)Polyclonal Antibody 0.2ml

RANA(Human rheumatoid arthritis associated nuclear artigen) ELISA Kit  人抗类风湿关节炎核抗原CAS号：112529154 腐胺(束缚态)检测试盒50THuman/人Elisa试盒30389254

99%25g1g桑辛素 M1634044Cyclosprin A

 1% NaC1甘露醇发酵管BR20支国产/进口

Cyclovirobuxine阿米松双酯标准品规格：规格：人芳烃受体(Ah receptor)Polyclonal Antibody 0.2ml

THP(Human TH glycoprotein) ELISA Kit  人TH糖蛋白CAS号：112390 精胺(结合态)检测试盒50mlHuman/人Elisa试盒3039836

泽泻醇B23醋Dufinder（效果同Genefinder）核染料（10,000× DMSO溶液）20mg

 缓冲蛋白胨水(缓冲胨水增菌液) (BPW) 规格： 250g 用途： 用于沙门氏菌前增菌培养。（国FDA charpter 4）

  新生牛血清*1肌醇检测试盒25gHuman/人Elisa试盒4792670

EB（10,000× 水溶液）5mg

十一甲酯(标准品) 质量规格：分析标准品 Methyl undecanoate

  特级马血清进口、分装化α；β水解酶域包含蛋白5检测试盒5gHuman/人Elisa试盒4792670

Goldview（10,000× DMSO溶液）5mg

 小鼠淋巴管内皮细胞*培养基100mL

Anthrax  炭疽沉淀素血清(马来源)进口、原装化围脂滴蛋白检测试盒5gHuman/人Elisa试盒479276
龟分枝杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒槐角苷;Sophoricoside CAS号： 152954 规格： 20mg 订购|咨询

槐定碱;Sophoridine CAS号： 83148918 规格： 20mg 订购|咨询

汉黄芩素;Wogonin CAS号： 632859 规格： 20mg 订购|咨询

4酰肼盐盐;4Sulfon CAS号： 27918190 规格： 20mg 订购|咨询

亥茅苷;SecOGlucosylh CAS号： 80681443 规格： 20mg 订购|咨询

黄体;Progesterone CAS号： 57830 规格： 20mg 订购|咨询

黄杨碱;Cyclovirobuxine CAS号： 860797 规格： 20mg 订购|咨询

茴香脑;cisAnethol CAS号： 104461 规格： 20mg 订购|咨询

黄柏;obacunone CAS号： 751031 规格： 20mg 订购|咨询

黄柏碱;Phellodendrine CAS号： 6873138 规格： 20mg 订购|咨询

哈巴苷;harpagide CAS号：  规格： 20mg 订购|咨询

哈巴俄苷;Harpagoside CAS号： 19210129 规格： 20mg 订购|咨询

汉黄芩苷;Wogonoside CAS号： 51059440 规格： 20mg 订购|咨询

黄芩素;Baicalein CAS号： 491678 规格： 20mg 订购|咨询

黄豆黄苷; Glycitin CAS号： 40246104 规格： 20mg 订购|咨询
荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：
(1)将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
产品仅用于科研其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为肿瘤或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。