当前位置:上海研生实业有限公司>>定量PCR试剂盒>>探针法荧光定量PCR试剂盒>> 50T差异支原体探针法荧光定量PCR试剂盒
CAS | 详见说明书 | 纯度 | 详见说明书 |
---|---|---|---|
分子量 | 详见说明书 | 分子式 | 详见说明书 |
供货周期 | 现货 | 规格 | 50T |
货号 | YSP6973 | 应用领域 | 化工 |
主要用途 | 公司产品仅用于科研 |
【产品名称】差异支原体探针法荧光定量PCR试剂盒
【英文名称】Mycoplasma dispar
【产品编号】YSP6973
【包装规格】50T
【预期用途】
产品仅用于科研本产品可用于肉及肉制品中鸭源性成分的定性检测,所用仪器为实时荧光PCR仪,可通过实时扩增曲线判断样品中是否存在鸭源性成分。
【检验原理】
本试剂盒采用实时荧光PCR技术,针对鸭源性成分核酸序列设计特异性引物和荧光探针,通过实时荧光一步法RT-PCR(Taqman探针法)对鸭源性成分核酸进行定性检测。
*的扩增性能:
高性能的UNICONTM Taq DNA聚合酶及优化的反应体系保证更高的扩增效率。以相同量的293T细胞cDNA为模板,扩增β-actin基因,与同类产品相比,UNICONTM qPCR Master Mix扩增信号更强,扩增效率更高。?
PCR实验方法步骤:
差异支原体探针法荧光定量PCR试剂盒方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:
循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 94℃ | 5 min | 1 |
变性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
终延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
实验步骤:
典型的PCR由
(1)高温变性模板;
(2)引物与模板退火;
(3)引物沿模板延伸三步反应组成一个循环,通过多次循环反应,使目的DNA得以迅速扩增。其要步骤是:
将待扩增的模板DNA置高温下(通常为93℃-94℃)使其变性解成单链;
人工合成的两个寡核苷酸引物在其合适的复性温度下分别与目的基因两侧的两条单链互补结合,两个引物在模板上结合的位置决定了扩增片段的长短;
耐热的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃将单核苷酸从引物的3’端开始掺入,以目的基因为模板从5’→3’方向延伸,合成DNA的新互补链。
Alphalipoic acid整合素A5检测试剂盒20mg
醋普兰林肽 质量规格:纯度≥98.0% Pramlintide Acetate 尿道定位显色培养基/Urine Orientation Chromogenic Medium分离和鉴别常见尿道致病菌1升国产/进口
Glucosamine Hydrochloride前列地尔标准品规格:规格:人和肽素(CPP)Polyclonal Antibody 0.2ml
TnT(Human Troponin T) ELISA Kit 人肌钙蛋白TCAS号:11680 脂多糖检测试盒100gHuman/人Elisa试盒30484776
Caffeic acid整合素α2检测试剂盒10mg
异鼠李素-3-O-葡萄糖苷 英文名称:Isorhamnetin -3-O- glucoside 保存:-20℃ 规格:HPLC≥98% 20mg/支 兔抗甲状腺球蛋白
Rotundine六密标准品规格:规格:人膜联蛋白-A3 Polyclonal Antibody 0.2ml
ESAb(Human antiEndostatin antibody) ELISA Kit 人血管内皮抑素抗体CAS号:1105067886β葡聚糖检测试盒1kgHuman/人Elisa试盒304851998
5(6)羧基四基罗丹明(混合物)5mg
糖精钠 水合物(标准品) 质量规格:分析标准品 Saccharin sodium salt hydrate
Rabbit Antihuman IgG Whole serum 兔抗人IgG抗血清现货供应己糖激酶1检测试盒100gHuman/人Elisa试盒4836139
6羧基罗丹明110琥珀酰亚(单一化合物)5mg
万古霉素(改良月桂基盐胰蛋白胨肉汤冻干配套试剂) 规格: 10支/盒 用途: 每支添加于100ml(022212)中配成MLST
Rabbit Antihuman IgM Whole serum 兔抗人IgM抗血清*蛋白酪氨酶非受体型11检测试盒25gHuman/人Elisa试盒4837881
5羧基罗丹明110琥珀酰亚(单一化合物)5mg
标准溶液(0.05000mol/L(0.1N)) 质量规格:0.05000mol/L(0.1N) Iodine solution
Rabbit Antihuman IgA Whole serum 兔抗人IgA抗血清进口、分装葡萄糖6异构酶检测试盒5gHuman/人Elisa试盒4837881
差异支原体探针法荧光定量PCR试剂盒穿心莲内;Andrographolid CAS号: 5508587 规格: 20mg 订购|咨询
刺五加苷B;Eleutheroside CAS号: 118343 规格: 20mg 订购|咨询
刺五加苷E;Eleutheroside CAS号: 39432569 规格: 20mg 订购|咨询
橙黄决明素;Aurantioobtus CAS号: 67979253 规格: 20mg 订购|咨询
橙皮苷;Hesperidin CAS号: 520263 规格: 20mg 订购|咨询
川续断皂苷;dipsacoside B CAS号: 33289859 规格: 20mg 订购|咨询
草乌素;Bulleyaconitine CAS号: 107668791 规格: 20mg 订购|咨询
长春新碱;Vincristine CAS号: 57227 规格: 20mg 订购|咨询
长春花碱;Vinblastine CAS号: 865214 规格: 20mg 订购|咨询
长春质碱;Catharanthine CAS号: 2468215 规格: 20mg 订购|咨询
白果双黄;Bilobetin CAS号: 521324 规格: 20mg 订购|咨询
3表熊果;3Epiursolic CAS号: 989300 规格: 20mg 订购|咨询
()白雀木;LQuebrachi CAS号: 642386 规格: 10mg 订购|咨询
八姜黄素;octahydrocurcu CAS号: 36062074 规格: 20mg 订购|咨询
白杨素7葡萄糖醛苷;Chrysin CAS号: 规格: 20mg 订购|咨询
荧光定量PCR检测方法包括以下步骤:
(1)将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
产品仅用于科研其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为:待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为肿瘤或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
请输入账号
请输入密码
请输验证码
以上信息由企业自行提供,信息内容的真实性、准确性和合法性由相关企业负责,化工仪器网对此不承担任何保证责任。
温馨提示:为规避购买风险,建议您在购买产品前务必确认供应商资质及产品质量。