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CAS | 详见说明书 | 纯度 | 详见说明书 |
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分子量 | 详见说明书 | 分子式 | 详见说明书 |
供货周期 | 现货 | 规格 | 50T |
货号 | YSP6970 | 应用领域 | 化工 |
主要用途 | 公司产品仅用于科研 |
实验步骤:
典型的PCR由
(1)高温变性模板;
(2)引物与模板退火;
(3)引物沿模板延伸三步反应组成一个循环,通过多次循环反应,使目的DNA得以迅速扩增。其要步骤是:
将待扩增的模板DNA置高温下(通常为93℃-94℃)使其变性解成单链;
人工合成的两个寡核苷酸引物在其合适的复性温度下分别与目的基因两侧的两条单链互补结合,两个引物在模板上结合的位置决定了扩增片段的长短;
耐热的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃将单核苷酸从引物的3’端开始掺入,以目的基因为模板从5’→3’方向延伸,合成DNA的新互补链。
【产品名称】牛支原体探针法荧光定量PCR试剂盒
【英文名称】Mycoplasma bovis
【产品编号】YSP6970
【包装规格】50T
【预期用途】
产品仅用于科研本产品可用于肉及肉制品中鸭源性成分的定性检测,所用仪器为实时荧光PCR仪,可通过实时扩增曲线判断样品中是否存在鸭源性成分。
【检验原理】
本试剂盒采用实时荧光PCR技术,针对鸭源性成分核酸序列设计特异性引物和荧光探针,通过实时荧光一步法RT-PCR(Taqman探针法)对鸭源性成分核酸进行定性检测。
*的扩增性能:
高性能的UNICONTM Taq DNA聚合酶及优化的反应体系保证更高的扩增效率。以相同量的293T细胞cDNA为模板,扩增β-actin基因,与同类产品相比,UNICONTM qPCR Master Mix扩增信号更强,扩增效率更高。?
PCR实验方法步骤:
牛支原体探针法荧光定量PCR试剂盒方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:
循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 94℃ | 5 min | 1 |
变性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
终延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
荧光定量PCR检测方法包括以下步骤:
(1)将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
产品仅用于科研其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为:待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为肿瘤或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
Rutin张力蛋白4检测试剂盒20mg
酚-3-葡萄糖鼠李糖苷 订购|咨询 规格: 20mg 人视黄醇结合蛋白1(RBP1)ELISA试剂盒人96T1.56-100 ng/mL大鼠肿瘤坏死因子配体超家族成员12(TNFSF12)ELISA试剂盒,英文名:TNFSF12 ELISA Kit
MatrineALPHA-乳白蛋白标准品规格:规格:人腺苷蛋氨脱羧酶(AMD1)Polyclonal Antibody 0.2ml
人FMS样酪氨激酶3(FLT3)HAGHL 羟基酰谷胱甘肽水解酶样蛋白抗体规格:96T/48TAlprazolam Related Compound A规格:200mgCD38分子检测试盒20mg人肝癌细胞,Bel7405细胞1x10^6cells
Astilbin真核起始因子4A II检测试剂盒20mg
钙;纯品型;标准品;有证书 订购|咨询 规格: 0.1g 成蛋白相关蛋白1抗体 TOR2A ELISA Kit 耐扭蛋白2A(TOR2A)ELISA试剂盒
Oxymatrine盐阿法罗定标准品规格:规格:人γ-分泌酶(γ-secretase/GACE)Polyclonal Antibody 0.2ml
人TRAILHEATR7B2 热休克蛋白受体家族蛋白7B2抗体规格:96T/48TAlprostadil规格:20mgCD3分子检测试盒20mg人肝癌细胞,Hep G2细胞1x10^6cells
98%100g50g性酶(ALP)检测试剂盒(二钠比色法)Prepro adrenomedullin
硬脂(分析标准品,≥99.5%(GC)) 质量规格:分析标准品,≥99.5%(GC) Stearic acid
Rabbit Antihorse IgG Whole serum 兔抗马IgG抗血清进口、分装亚铁螯合酶检测试盒1gHuman/人Elisa试盒4836139
98%5g10g性酶(ALP)检测试剂盒(二钠比色法)Actin IgA
大鼠肾系膜细胞*培养基100mL
Rabbit AntiHRP Whole serum 兔抗HRP抗血清进口、原装ABO组织血型系统转移酶检测试盒5gHuman/人Elisa试盒4836139
98%1g500g性酶(ALP)检测试剂盒(二钠比色法)tissue transglutaminase
L-山梨糖(标准品) 质量规格:分析标准品 L-(-)-Sorbose
Vitamin PP Assay Broth250精氨酶检测试盒5mg睾检测试盒argininevasopressin
牛支原体探针法荧光定量PCR试剂盒茶碱 ;Theophylline CAS号: 58559 规格: 100mg 订购|咨询
刺五加叶中;Hederasaponin CAS号: 36284772 规格: 20mg 订购|咨询
长梗冬青苷;Pedunculoside CAS号: 42719324 规格: 20mg 订购|咨询
重楼皂苷Ⅶ;Polyphyllin VI CAS号: 76296758 规格: 20mg 订购|咨询
重楼皂苷Ⅵ;Polyphyllin VI CAS号: 55916513 规格: 20mg 订购|咨询
重楼皂苷II;Chonglou Sapo CAS号: 76296725 规格: 20mg 订购|咨询
重楼皂苷I;Chonglou Sapon CAS号: 50773416 规格: 20mg 订购|咨询
粗茎头碱;Crassicauline CAS号: 79592919 规格: 20mg 订购|咨询
橙黄Ⅳ;Orange IV CAS号: 554734 规格: 20mg 订购|咨询
橙黄Ⅱ;Orange Ⅱ CAS号: 633965 规格: 20mg 订购|咨询
橙黄Ⅰ;Orange I CAS号: 523444 规格: 20mg 订购|咨询
α常春藤皂苷;AHederin CAS号: 35790955 规格: 20mg 订购|咨询
虫草素;Cordycepin CAS号: 73030 规格: 20mg 订购|咨询
常春藤皂苷元;Hederagenin CAS号: 465996 规格: 20mg 订购|咨询
蟾毒灵;Bufalin CAS号: 465214 规格: 20mg 订购|咨询
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