当前位置:上海研生实业有限公司>>定量PCR试剂盒>>探针法荧光定量PCR试剂盒>> 50T非洲分枝杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒
CAS | 详见说明书 | 纯度 | 详见说明书 |
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分子量 | 详见说明书 | 分子式 | 详见说明书 |
供货周期 | 现货 | 规格 | 50T |
货号 | YSP6943 | 应用领域 | 化工 |
主要用途 | 公司产品仅用于科研 |
参数规格:
产品名称:非洲分枝杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒
英文名称:Mycobacterium africanum
产品规格:50T
产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
产品特点:本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。
运输及保存
低温运输,-20℃保存,保存期限一年。
自备试剂
DNA模板、10×ROX(根据机型决定,具体见使用方法)。
产品及特点:
1. 即开即用,用户只需要提供病毒样品。
2. 根据鲍疱疹样病毒探针法荧光定量保守序列设计的专一性引物,与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量PCR检测,避免后续污染。
5. 本试剂盒足够50次20μL反应体系的荧光定量PCR。
本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。?
实验过程:
一、非洲分枝杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒试剂准备
1. DNA模板
2.产品仅用于科研对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
使用方法:
一、稀释PCR阳性对照(以10E2-10E7拷贝/μL这6个10倍稀释度为例)
1. 注意:由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的DN段作为阳性对照。
2. 标记6个离心管,分别为7,6,5,4,3,2。
3. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR模板稀释液(用带芯枪头,下同)。
4. 在7号管中加入5 μL 1×10E8拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡1分钟,得1×10E7拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头,在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E6拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
6. 换枪头,在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL的阳性对照到5号管中,充分震荡1分钟,得1×10E5拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。放冰上待用。
二、样品DNA的制备
8. 如果有N个样品,必须设置N+2个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是NC(样品制备阴性对照)??梢杂?0μL上步制备的PCR阳性对照的第4号(浓度为1×10E4 拷贝/μL,10μL相当于1万拷贝)或第5号(浓度为1×10E5 拷贝/μL,10μL相当于10万拷贝)再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样,以此作为PC。另外用水作为NC。如果每次制备需要200μL样品,则PC和NC的体积也必须是200μL。
9. 用自选方法纯化样品的DNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒DNA提取试剂盒兼容。
三、设置qPCR反应(20 μL体系,在样品制备室进行)
10. 如果只做1次重复,则标记N+9个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照,6个用于PCR阳性对照。如果做2-3次重复,则反应设置数量相应增加2或3倍。
11. 在标记管中按下表加入各成分(本表只列出一次重复。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照,并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好。
以下是公司正在热销的产品:
Cyclovirobuxine中心体蛋白350kDa检测试剂盒20mg
木栓;Friedelin 订购|咨询 规格: 5mg 淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒蛋白抗体 ABCG2 ELISA Kit ATP结合盒转运蛋白G2(ABCG2)ELISA试剂盒
尾加压素2(UST2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)重组人 FAM171B / KIAA1946 蛋白 (Fc 标签)*100(g)
人组织子(TF)ELISA试盒WDR23 WDR23蛋白抗体规格:96T/48TAlbendazole规格:200mgB7同源体1检测试盒20mg人恶性黑色素瘤细胞,MeWo细胞1x10^6cells
Eugenol中心体纺锤体极相关蛋白1检测试剂盒50mg
胡椒碱;Piperine 订购|咨询 规格: 20mg 乳腺癌抗雌激素耐药蛋白1 ANP ELISA Kit 利钠肽(ANP)ELISA试剂盒
血小板内皮细胞粘附分子1(PECAM1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)重组人 CART / CARTPT 蛋白*250(g)
人血小板子4(PF4)ELISA试盒SKP1 S期激酶相关蛋白1抗体规格:96T/48T规格:200mgB7同源体2检测试盒20mg人非小细胞肺癌细胞,HCC827细胞1x10^6cells
红车轴草根苷; 红车轴草根甙;三叶豆根苷; 高丽槐素D葡萄糖FullGene转染试剂(效果同FuGene HD)5mg
钠多粘菌素B肉汤基础/SCPB基础/SCPB Base/Sodium Chloride Polymyxin Broth Base副溶血弧菌的选择性增菌培养250克国产/进口
Blood Agar Base250单?;视王ッ讣觳馐院?mg雌二醇检测试盒LuteinizingHormone
酰紫堇醇灵FullGene转染试剂(效果同FuGene HD)5mg
正癸(分析标准品,≥99.5%(GC)) 质量规格:分析标准品,≥99.5%(GC) Decanoic acid
Blood Enrichment Medium250单酰基甘油酯酶检测试盒5mg黄体生成素检测试盒prolactin
异栎素;罗布麻素;槲皮素3O葡萄糖苷Lip2000转染试剂5mg
标准Ⅰ号营养琼脂/标准1号营养琼脂/Standard Ⅰ Nutrient Agar标准细菌计数,含糖250克国产/进口
TTCSabourand’s Medium250SIGMAR1检测试盒5mg催乳素检测试盒Progesterone
非洲分枝杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒金合欢素;Acacetin CAS号: 480444 规格: 20mg 订购|咨询
酒石;D()Tartaric ac CAS号: 526830 规格: 20mg 订购|咨询
;Formic acid CAS号: 64186 规格: 0.2ml 订购|咨询
10氧喜树碱;10Methoxy CAS号: 规格: 20mg 订购|咨询
香;Methyl eugenol CAS号: 93152 规格: 20mg 订购|咨询
巨豆三;Tabanone CAS号: 13215888 规格: 20mg 订购|咨询
3’氧芹菜苷;3’Methoxy CAS号: 规格: 10mg 订购|咨询
肌苷;Inosine CAS号: 58639 规格: 50mg 订购|咨询
正壬;2Undecanone CAS号: 112129 规格: 20mg 订购|咨询
4氧水杨;4Methoxysa CAS号: 2237367 规格: 20mg 订购|咨询
桔梗皂苷元;platycodigenin CAS号: 22327828 规格: 20mg 订购|咨询
焦袂康;3hydroxy4Hpy CAS号: 496639 规格: 20mg 订购|咨询
当药宁;Methylswertian CAS号: 22172174 规格: 10mg 订购|咨询
7O白杨素;7OMethyl CAS号: 规格: 20mg 订购|咨询
巨大戟; Ingenol CAS号: 30220463 规格: 20mg 订购|咨询
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