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CAS | 详见说明书 | 纯度 | 详见说明书 |
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分子量 | 详见说明书 | 分子式 | 详见说明书 |
供货周期 | 现货 | 规格 | 50T |
货号 | YSP7025 | 应用领域 | 化工 |
主要用途 | 公司产品仅用于科研 |
实验步骤:
典型的PCR由
(1)高温变性模板;
(2)引物与模板退火;
(3)引物沿模板延伸三步反应组成一个循环,通过多次循环反应,使目的DNA得以迅速扩增。其要步骤是:
将待扩增的模板DNA置高温下(通常为93℃-94℃)使其变性解成单链;
人工合成的两个寡核苷酸引物在其合适的复性温度下分别与目的基因两侧的两条单链互补结合,两个引物在模板上结合的位置决定了扩增片段的长短;
耐热的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃将单核苷酸从引物的3’端开始掺入,以目的基因为模板从5’→3’方向延伸,合成DNA的新互补链。
【产品名称】马苏大麻哈鱼病毒探针法荧光定量PCR试剂盒
【英文名称】Oncorhynchus Masou Virus(OMV)
【产品编号】YSP7025
【包装规格】50T
【预期用途】
产品仅用于科研本产品可用于肉及肉制品中鸭源性成分的定性检测,所用仪器为实时荧光PCR仪,可通过实时扩增曲线判断样品中是否存在鸭源性成分。
【检验原理】
本试剂盒采用实时荧光PCR技术,针对鸭源性成分核酸序列设计特异性引物和荧光探针,通过实时荧光一步法RT-PCR(Taqman探针法)对鸭源性成分核酸进行定性检测。
*的扩增性能:
高性能的UNICONTM Taq DNA聚合酶及优化的反应体系保证更高的扩增效率。以相同量的293T细胞cDNA为模板,扩增β-actin基因,与同类产品相比,UNICONTM qPCR Master Mix扩增信号更强,扩增效率更高。?
PCR实验方法步骤:
马苏大麻哈鱼病毒探针法荧光定量PCR试剂盒方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:
循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 94℃ | 5 min | 1 |
变性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
终延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
荧光定量PCR检测方法包括以下步骤:
(1)将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
产品仅用于科研其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为:待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为肿瘤或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
ECG吲哚2,3双加酶检测试剂盒20mg
血琼脂培养基基础 规格: 250g 用途: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验
Coptisine阿莫西林相关物质I标准品规格:规格:人膜联蛋白-A4(Anxa4)CLIA试剂盒 0.2ml
人白介素9(IL9)FBXO11 Fbox蛋白相关蛋白11抗体规格:96T/48TAmrinone Related Compound A规格:200mgI型胶原羟基端肽β降解产物检测试盒20mg人结肠癌细胞,NCIH716细胞1x10^6cells
EGCG隐热蛋白检测试剂盒20mg
木兰花碱 质量规格:HPLC≥98%,标准品 Magnoflorine
coptisine chloride两性霉素B标准品规格:规格:人血管生成素样蛋白3(ANGPTL3)CLIA试剂盒 0.2ml
REG4(Human regenerating gene IV ) ELISA Kit 人再生基蛋白IVCAS号:463176 三腺苷酶检测试盒100gHuman/人Elisa试盒3077121
98%5g1g植物二醛(MDA)检测试剂盒(TBA比色法)acting transcription factor 3
二十二(分析标准品,≥99.5%(GC)) 质量规格:分析标准品,≥99.5%(GC) Docosane
myelin P0 prothein( peripheral myelin prothein Zero;MPZ;MPP) 外周髓鞘蛋白0(P0蛋白)多肽抗原进口、原装端粒酶检测试盒1gHuman/人Elisa试盒492375
≥99%25g5g二醛(MDA)检测试剂盒(TBA荧光法)AntiMEF2D
Hs 746T(人胃细胞)5×106cells/瓶×2
Insulin protein (from porcine pancreas) 猪胰岛素蛋白现货供应二酯酶4检测试盒5gHuman/人Elisa试盒492386
98%100g25g二醛(MDA)检测试剂盒(TBA荧光法)Sclerostin
4,4'-二氨基二硫(标准品) 质量规格:分析标准品 4,4'-Thiodianiline
Bile salt from pigBR,65%核仁蛋白检测试盒20mg白细胞介素6检测试盒Interleukin7
马苏大麻哈鱼病毒探针法荧光定量PCR试剂盒没食子辛 CAS号: 1034011 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
没食子 CAS号: 99241 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
漏芦甾 CAS号: 137476712 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
律草 CAS号: 26472413 规格: HPLC≥98%;10mg 订购|咨询
龙胆 CAS号: 490799 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
藜芦 CAS号: 34036 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
氯天竺葵素 CAS号: 29956998 规格: HPLC≥98%;10mg 订购|咨询
碱 CAS号: 4845992 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
蓝萼素 CAS号: 79498310 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
萝卜苷 CAS号: 21414415 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
藜芦醛 CAS号: 120149 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
秋水仙苷 CAS号: 602415 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
轮环藤宁 CAS号: 294906 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
龙胆山 CAS号: 2798256 规格: HPLC≥98%;10mg 订购|咨询
雷公藤氯内 CAS号: 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
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