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養(yǎng)原代細胞可謂是個精細活,從事養(yǎng)細胞的人都知道養(yǎng)細胞的時候一旦不注意,就很容易造成細胞污染,所以想要養(yǎng)好細胞除了小心謹慎以外,還要提前做好準備:
細胞培養(yǎng)前的準備
1)在帶上手套開始細胞培養(yǎng)之前,先檢查一下移液管和瓶子的數(shù)量是否充足,以免在開始實驗后再次出入操作臺,這樣可以降低細胞污染的風險。
2)細胞培養(yǎng)基也應先預熱,選擇只預熱部分培養(yǎng)基而非整瓶加熱,不但可以節(jié)約實驗時間,而且可以避免因反復加熱培養(yǎng)基而造成的蛋白質(zhì)降解。
3)結(jié)束操作后,別忘了培養(yǎng)基對光敏感,應盡可能避光保存。
細胞培養(yǎng)的定期檢查
1)定期檢查培養(yǎng)細胞的形態(tài),即形狀和外觀,對于細胞培養(yǎng)實驗取得成功至關(guān)重要。
2)除確認細胞的健康狀態(tài)外,每次操作細胞時通過肉眼和顯微鏡檢查細胞還可早期發(fā)現(xiàn)污染征象,避免污染擴散至實驗室其他細胞。
細胞變質(zhì)的征象
1)原代細胞變質(zhì)的征象包括核周出現(xiàn)顆粒、細胞與基質(zhì)解離以及細胞質(zhì)空泡形成。
2)這些變質(zhì)征象可能為多種原因所致,例如:培養(yǎng)物污染、細胞系衰老或培養(yǎng)基中存在毒性物質(zhì),或者這些征象僅表明培養(yǎng)物需要更換培養(yǎng)基。
3)變質(zhì)嚴重時將會成為不可逆的變化。
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原代細胞
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