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小鼠杂交瘤细胞；EphB3图片【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。

细胞名称

小鼠杂交瘤细胞；EphB3图片

形态特性  淋巴母细胞样

生长特性 半贴壁生长

特征特性  该杂交瘤细胞由湖南远泰生物技术有限公司制备并提交，细胞注射小鼠腹腔可产生高滴度的单抗，可用于基础研究和临床检验。

培养条件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS

传代方法  1:3传代,2-3天传一代

传代情况 C10

冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS

支原体检测 阴性

STR

同工酶 同工酶鉴定

染色体

使用权限 A类

小鼠杂交瘤细胞；EphB3图片细胞培养步骤：

一．培养基及培养冻存条件准备：

1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。

2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。

3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。

二、细胞处理：

1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养）。第二天换液并检查细胞密度。

2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：

1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。

小鼠杂交瘤细胞；EphB3图片质量保证:

我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，*进口来源，*保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。   细胞到达客户手中，1个月内出现任何问题，导致细胞在冻存前死亡，我们公司都可以免费再向客户提供一次。

小鼠杂交瘤细胞；EphB3图片操作步骤：

1）贴壁细胞传代：提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。

2）悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。

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BMPR-1A(Bone Morphogenetic protein Receptor-1A)  骨成型蛋白受体1A抗原    进口/国产    规格:     0.5mg

PPAR-delta (peroxisome proliferator-activated receptor)  D型-过氧化酶活化增生受体(多肽）    现货供应    规格:     0.5mg

PP-2A (protein phosphatase 2A)  蛋白质磷酸酶-2A（抗原）    *    规格:     0.5mg

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SDS-PAGE 电泳液 ( 干粉 )5L

α-Actin 小鼠单抗1000μL

130637-500Tma 核酸内切酶 III500U

140659-1微量 RNA 定量试剂盒1mL

糖原Ⅲ型500mg