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资源名称: 刺孢吸水链霉菌昆明变种保存
种属:Streptomyceshygrospinocusvar.kungmingensisyanetZhang
安全等级 1
模式菌株 no
应用领域 产正放线酮类物质,能防治小麦锈病。
培养方法
培养基 12
生长条件 28-30℃
刺孢吸水链霉菌昆明变种保存检测方法:
1.将病人标本和/或液状对照品放至室温(15-30℃),轻轻混匀。测试前从包装袋中取出检测卡平放。
2.将1根Binax样本拭子浸入要测试的标本中,*浸没拭子头。如果拭子有滴水,将拭子靠在收集容器的边上,排去多余的液体。
3.检测卡内部的右手边有两个孔,将拭子插入底部的孔中(拭子孔),稳步向前推,使整个拭子头在上部的孔中可见,不要取出拭子。
4.垂直持放A试剂瓶,高出检测卡上方1/2到1英寸,慢慢向底部的孔中加入3滴A试剂。
5.立即从检测卡的右缘揭去粘附衬,封闭检测卡,过15分钟在窗口判读结果。15分钟后读取的结果可能不准确。然而,有些阳性病人不到15分钟就出现可见样品线。
刺孢吸水链霉菌昆明变种保存注意事项:
1. 取细胞的过程中注意带好防冻手套,护目镜。此项尤为重要,细胞冻存管可能漏入液氮,解冻时冻存管中的气温急剧上升,可导致爆炸。
2. 冻存液的问题:冻存液的配置已是常识,在这里不作详述,但二甲基亚砜(DMSO)对细胞不是*无毒副作用,在常温下,二甲基亚砜对细胞的毒副作 较大,因此,必须在1-2min内使冻存液*融化。如果复苏温度太慢,会造成细胞的损伤,二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。
3. 离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高,注意加入少量培养液可稀释其浓度,以减少对细胞的损伤。
4. 离心问题:目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养,第二天换液。因为离心的目的是两个,去除 DMSO,去除死细胞,这个是标准流程,但对一般人来说,把握不好离心转速和时间,转的不够活细胞沉底的少,细胞就全被扔掉了,转过了活细胞会受压过大, 死亡。此外在操作过程中容易污染,所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO),DMSO对细胞有一定的毒副作用,所以须将离心后的液 体前倒净,且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏,结果无有异常。
5. 细胞贴壁少的问题:教科书中说明冻存细胞解冻时1ml细胞液要加10ml-15m培养液,而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。
6. 复苏细胞分装的问题:试验中我的经验总结为复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中,分装过多,细胞浓度过低,不利于细胞的贴壁。
7. 加培养基的量放入问题:这个量的多少的把握主要涉及到的问题是DMSO的浓度,从如果你加培养基的太少,那么DMSO的浓度就会比较大,就会影响 细胞生长,从以前的资料来看,DMSO的浓度在小于0.5%的时候对一般细胞没有什么影响,还有一个说法是1%。所以如果你的冻存液的浓度是 10%DMSO的话那么加10ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
22-0250-100 DiIC1(5) 碘化物 100mg
22-0260-100 DiIC12(3) 高氯酸化物 100mg
22-0270-10 DiO( 细胞膜绿色荧光探针 ) 10mg
22-0280-100 DiOC6(3) 碘化物 100mg
22-0290-20 ER-Tracker Red( 内质网红色荧光探针 ) 20μL
22-0300-250 Fluo-3AM( 钙离子荧光探针 ) 250μL
22-0310-1 Fluo-3,五铵盐 1mg
22-0320-25 Fluorescein-5-maleimide 25mg
22-0330-1 Fura-2 AM( 钙离子荧光探针 ) 1mg
22-0340-1 Fura-2,五铵盐 1mg
22-0350-1 Golgi-Tracker Red( 高尔基体红色荧光探针 ) 1mg
22-0380-10 Hydroxystilbamidine 10mg
22-0390-1 Indo-1 AM 1mg
22-0400-1 Indo-1,五铵盐 1mg
22-0410-1 JC-1 1mg
22-0420-5 JC-10 5mg
22-0430-10 Lucigenin( 光泽精 ) 10mg
22-0440-50 Lyso-Tracker Red( 溶酶体红色荧光探针 ) 50μL
22-0450-100 MEQ,(6- 甲氧 -N- 乙基喹啉碘 ) 100mg
22-0460-50 Mito-Tracker Green( 线粒体绿色荧光探针 ) 50μL
22-0470-1 MM1-43(FM®1-43) 1mg
22-0480-1 MM4-64(FM®4-64) 1mg
22-0490-25 Monobromobimane [mBBR] 25mg
22-0500-20 MQAE( 氯离子荧光探针 ) 20mg
22-0510-25 NAO 25mg
22-0520-25 NBD-Cl 25mg
22-0530-25 Nile Red 25mg
22-0550-1 Quin-2AM 1mg
22-0560-1 Rhod-2,三钠盐 1mg
22-0570-5 Rhodamine123 5mg
22-0580-25 SPQ(6- 甲氧基 -N-(3- 磺丙基 ) 喹啉 ) 25mg
22-0590-25 TMRE 25mg
22-0600-25 TSQ(6- 甲氧基 -(8-p- 甲苯磺酰胺 ) 喹啉 25mg
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