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人结直肠腺癌细胞；COLO 205*操作步骤：

1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。

2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。

3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。

4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。

5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。

6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。

7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。

8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。

9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。

10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。

11. 镜检观察。

人结直肠腺癌细胞；COLO 205*现货直销，免费快递送货上门。公司供应各种细胞株，细胞系，种类齐全，现货，质量保证，公司所有产品仅供科研使用，不得用于医学诊断。使用前仔细阅读本说明书。

细胞名称 人结直肠腺癌细胞；COLO 205*

形态特性  上皮样

生长特性 贴壁生长

特征特性  该细胞系1957年由T.U.Sample等从患有结肠癌的70岁男性白人的腹水分离。 该病人在取腹水样品前已用5-氟尿嘧啶治疗4-6周。 角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性。

培养条件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  优质胎牛血清，10%

传代方法  消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。

传代情况 PN5

冻存条件  *培养基+8%DMSO

支原体检测 阴性

STR  Amelogenin:X；CSF1PO:11,12；D13S317:10,12；D16S539:12,13；D18S51:18；D19S433:13,14；D21S11:30.2,33.2；D2S1338:17,18；D3S1358:16；D5S818:10,13；D7S820:9,10；D8S1179:9,14；FGA:21,23；TH01:8,9；TPOX:11；vWA:15

同工酶

染色体

使用权限 A类

人结直肠腺癌细胞；COLO 205*运输保存：

采用干冰保存运输。收到细胞时，若干冰已经*融化，请立即将细胞复苏培养；若尚留有干冰，请立即将细胞放入液氮中保存待用，请按条件贮存细胞，切不可将细胞置于高温环境。

保存条件：4℃保存一年;-20℃长期保存

用途：只可用于科研。

储存：液氮。

运输：干冰(第二代培养末期液氮冻存)。

细胞一般2-3天更换一次培养基，这取决于细胞生长的速度。许多细胞培养实验室通常在周一，周三，周五更换培养基。

注意：*次植入后，在6-16小时内更换培养基，以去除残留的二甲基亚枫和死亡细胞。到达客户手中，出现任何问题（人为或者非人为），导致细胞在冻存前死亡，我们公司都可以免费再向客户提供一次。对于细胞的真实性，支持客户检测对应的biomarker，（如证明细胞错误，全额退款。）公司针对每株细胞，鉴定gene background，鉴定完成的细胞可以提供数据，用于证明细胞的真实性，并且帮助客户更多的了解细胞特性。

100867-500 SDS-PAGE 浓缩胶配胶液 500mL

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100868-500 SDS-PAGE 分离胶配胶液 500mL

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100873-100 电泳级尿素 100g

100873-100 电泳级尿素 100g

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100874-1.5 DNA 尿素 -PAGE 上样液 1.5mL

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100874-1.5 DNA 尿素 -PAGE 上样液 1.5mL

100874-10 DNA 尿素 -PAGE 上样液 10mL

100874-10 DNA 尿素 -PAGE 上样液 10mL

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100875-1.5 DNA 非变性 PAGE 上样液 1.5mL

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100875-10 DNA 非变性 PAGE 上样液 10mL