蛋白表達及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中，通過瞬時表達產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Fucosidase Alpha L1, Tissue (FUCa1)

A-FU; aFU; Alpha-L-Fucosidase; Alpha-L-fucoside fucohydrolase 1

型號：GOY-01D1460

酶與激酶

腫瘤免疫

肝膽病學(xué)

物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

來源：原核表達

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：Lysosome

預(yù)測分子量：33.2kDa

實際分子量：-(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Lys170~Leu420 (Accession # P17164) with

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點：6.7

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

肌酸激酶B(CK-BB)活性蛋白英文名稱：Active Creatine Kinase B (CK-BB)CKB; CKBB; CK-B; CK-1; Creatine Kinase, Brain物種：Human，人

腺苷酸環(huán)化酶關(guān)聯(lián)蛋白1(CAP1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Adenylyl Cyclase Associated Protein 1 (CAP1)CAP; CAP1-PEN物種：Human，人

Ⅹ組磷脂酶A2(PLA2G10)重組蛋白英文名稱：Recombinant Phospholipase A2, Group X (PLA2G10)GXPLA2; GX sPLA2; sPLA2-X; Group 10 secretory phospholipase A2; Phosphatidylcholine 2-acylhydrolase 10物種：Human，人

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

淋巴細胞性白血病相關(guān)序列1抗體 LYL1 0.2ml

半乳糖凝集素12抗體 Galectin 12/LGALS12 0.2ml

基質(zhì)交感分子1抗體 STIM1 0.2ml

磷酸化蛋白激酶C theta抗體 phospho-PRKCQ(Thr538) 0.1ml

感染性蛋白蛋白1抗體 ASC2/POP1 0.2ml

膜相關(guān)環(huán)指蛋白11抗體 43170 0.2ml

1號染色體開放閱讀框187抗體 C1orf187 0.2ml

/蛋白激酶TNN13K抗體 TNNI3K 0.2ml

γ晶狀體蛋白S抗體（γS-crystallin） gamma crystallin S 0.2ml

結(jié)腸癌相關(guān)蛋白MIC1抗體 MIC1/C18orf8 0.2ml

1號染色體開放閱讀框31抗體 C1orf31 0.2ml

血紅素結(jié)合蛋白1抗體 HEBP1/p22HBP 0.2ml

巖藻糖苷酶αL1(FUCa1)重組蛋白大鼠L-Histidine L-組鹽酸鹽25g瓶

Uridine-5'-phosphate-UMP 尿苷-5-單磷酸58-97-950mg

固相RNase清除劑250ml瓶

6孔培養(yǎng)板50塊/箱塊

2ml注射器 國產(chǎn)1支袋

L-Proline L-25g瓶

Kaempferide 素491-54-320mg

-BSA0.1ml支

尼龍膜(0.45um)30cm×3m卷

檸檬酸鈉抗原修復(fù)液(50×)500ml瓶

D-(-)-Quinic acid D-(-)-奎寧酸77-95-220mg

Albumin Human 人血清白蛋白500mg瓶

dNTPs Mix(2.5mM each)1ml支