蛋白表达及纯化：

1.培养500ml哺乳动物细胞，然后将重组质粒转染到细胞中，通过瞬时表达产生目标蛋白。

2.收集含有目标蛋白的部分（细胞或培养上清）。

3.通过亲和，离子交换，疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白。

4.通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制最终产品质量。

5.通过Western-blot验证目标蛋白正确性。

交付内容：纯化好的目标蛋白及纯化报告。可按客户要求提供含纯化标签（Tag）或切除纯化标签（Tag）的最终蛋白，纯度最高可达90%以上。

产品属性：

英文名称：Recombinant Homogentisate-1,2-Dioxygenase (HGD)

AKU; HGO; Homogentisic Acid Oxidase; Homogentisicase; Homogentisate oxygenase

型号：GOY-01D1327

酶与激酶

物种：Mus musculus (Mouse，小鼠)

来源：原核表达

宿主E.coli

内毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法测定)

亚细胞定位：：n/a

预测分子量：30.7kDa

实际分子量：27kDa(差异分析请参阅说明书)

片段与标签：Val190~Pro429 (Accession # O09173) with

缓冲液成份：磷酸盐缓冲液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性状：冻干粉

纯度：> 95%

等电点：6.5

应用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

规格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相关产品：

产品名称：组氨tRNA合成酶2(HARS2)重组蛋白  物种：Mus musculus (Mouse，小鼠)  英文名称：Recombinant Histidyl tRNA Synthetase 2, Mitochondrial (HARS2)

产品名称：组氨tRNA合成酶2(HARS2)重组蛋白  物种：Homo sapiens (Human，人)  英文名称：Recombinant Histidyl tRNA Synthetase 2, Mitochondrial (HARS2)

产品名称：蛋白甲基转移酶1(PRMT1)重组蛋白  物种：Homo sapiens (Human，人)  英文名称：Recombinant Protein Arginine Methyltransferase 1 (PRMT1)

产品名称：羟酰水解酶(HAGH)重组蛋白  物种：Mus musculus (Mouse，小鼠)  英文名称：Recombinant Hydroxyacylglutathione Hydrolase (HAGH)

产品名称：羟酰水解酶(HAGH)重组蛋白  物种：Homo sapiens (Human，人)  英文名称：Recombinant Hydroxyacylglutathione Hydrolase (HAGH)

操作步骤：

Ⅰ 实体组织蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂， 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。

2．  每100mg固体组织置于培养皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小块，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃匀浆器上下手动匀浆15次，注意低温操作；

3． 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管，离心10000转/分，4℃离心5 min；

4． 取上清转移至新的预冷的离心管中，即为全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。

Ⅱ 培养细胞蛋白提取

1． 贴壁培养的细胞，吸去培养基后，加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次，每次振摇数次以尽量去除培养液；

2． 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞，将细胞及培养液移至离心管中， 1000转/分离心10 min，再用10mL/150mm培养板的冷PBS，1000转/分离心5 min洗两次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂， 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。

4． 细胞洗涤后，转至新的预冷的离心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃摇床平台上，温和振荡15 min；

6． 14,000rpm，4℃离心15min，取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。

公司正在出售的产品：

线粒体辅酶还原酶核心蛋白2抗体 UQCRC2

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未分化胚胎干细胞转录因子1抗体 UTF1

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泛素相关蛋白1抗体（鼻咽癌相关基因20蛋白） UBAP1

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子宫珠蛋白抗体 Uteroglobin

尿卟啉原脱羧酶抗体 UROD

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Cysteamine hydrochloride 半胱胺盐酸盐156-57-020mg

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Phenacetin丁25g瓶

Agrimol B 仙鹤草酚B（鉴别用）55576-66-410mg

Tryptone 胰蛋白胨500g瓶

Sulfamerazine 磺胺甲127-79-7100mg

PEG 20000 聚乙二醇 20000250g瓶

Diosmetin-7-O-β-D-glucopyranoside 香叶木素-7-O-葡萄糖苷6559-91-720mg

PBS干粉(pH7.2-7.4 0.01M)2L包