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周期素依赖性激酶4(CDK4)重组蛋白小鼠

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所  在  地上海市

更新时间:2025-07-21 12:27:44浏览次数:255次

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供货周期 现货 规格 10μg50μg200μg1mg5mg
货号 GOY-01D1262 应用领域 化工
主要用途 仅供科研实验 英文名称 Recombinant Cyclin Dependent Kinase 4 (CDK4)
物种 Mus musculus (Mouse,小鼠)
周期素依赖性激酶4(CDK4)重组蛋白小鼠公司正在出售的产品:磷酸化转录因子MYB相关蛋白B抗体 英文名称:phospho-B MyB (Thr487) 0.1ml磷酸化B-Raf抗体 英文名称:phospho-B-Raf (Ser729) 0.1ml磷酸化B-Raf抗体 英文名称:phospho-B Raf (Thr598) 0.1ml

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产品属性:

产品名称

物种

货号

周期素依赖性激酶4(CDK4)重组蛋白小鼠

Mus musculus (Mouse,小鼠)

GOY-01D1266

 

 

英文名称:Recombinant Cyclin Dependent Kinase 4 (CDK4)

CMM3; PSK-J3; Cell division protein kinase 4

型号:GOY-01D1266

酶与激酶

肿瘤免疫

物种:Mus musculus (Mouse,小鼠)

来源:原核表达

宿主E.coli

内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)

亚细胞定位::Cytoplasm. Nucleus. Membrane.

预测分子量:33.8kDa

实际分子量:31kDa(差异分析请参阅说明书)

片段与标签:Tyr6~Leu295 (Accession # P30285) with

缓冲液成份:磷酸盐缓冲液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)

性状:冻干粉

纯度:> 95%

等电点:6.5

应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

规格10μg50μg200μg1mg5mg


蛋白表达及纯化:

1.培养500ml哺乳动物细胞,然后将重组质粒转染到细胞中,通过瞬时表达产生目标蛋白。

2.收集含有目标蛋白的部分(细胞或培养上清)。

3.通过亲和,离子交换,疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白。

4.通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制最终产品质量。

5.通过Western-blot验证目标蛋白正确性。

交付内容:纯化好的目标蛋白及纯化报告。可按客户要求提供含纯化标签(Tag)或切除纯化标签(Tag)的最终蛋白,纯度最高可达90%以上。

操作步骤:

Ⅰ 实体组织蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂, 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。

2.  每100mg固体组织置于培养皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小块,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃匀浆器上下手动匀浆15次,注意低温操作;

3. 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管,离心10000转/分,4℃离心5 min;

4. 取上清转移至新的预冷的离心管中,即为全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分装保存于-70℃,避免反复冻融。

Ⅱ 培养细胞蛋白提取

1. 贴壁培养的细胞,吸去培养基后,加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次,每次振摇数次以尽量去除培养液;

2. 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞,将细胞及培养液移至离心管中, 1000转/分离心10 min,再用10mL/150mm培养板的冷PBS,1000转/分离心5 min洗两次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂, 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。

4. 细胞洗涤后,转至新的预冷的离心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

 

细胞数量

Lysis Buffer加入量

107个

0.5 mL~1 mL

5×106个

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃摇床平台上,温和振荡15 min;

6. 14,000rpm,4℃离心15min,取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分装保存于-70℃,避免反复冻融。

公司正在出售的产品:

磷酸化结节性硬化症蛋白1抗体 phospho-TSC1(Thr417)

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磷酸化结节性硬化蛋白抗体 Phospho-TSC2(Ser540)

磷酸化结节性硬化蛋白抗体 Phospho-TSC2(Ser1420)

磷酸化结节性硬化蛋白抗体 Phospho-TSC2(Ser1798)

磷酸化结节性硬化蛋白抗体 Phospho-TSC2(Ser664)

磷酸化结节性硬化蛋白抗体 Phospho-TSC2(Ser1418)

肿瘤坏死因子受体1抗体 TNFR1

跨膜蛋白166抗体 TMEM166

肿瘤蛋白p53诱导蛋白13(肿瘤抑制基因) TP53I13

跨膜蛋白超家族9-1抗体 TM9SF1

周期素依赖性激酶4(CDK4)重组蛋白小鼠Catechin hydrate 儿茶精水合物88191-48-420mg

碱性(1:200000)100G瓶

2,3-Dihydroxybenzoic acid 2,3-二羟基苯甲酸303-38-850mg

TetraMethylaMMoniuM hydroxide pentahydrate 四甲氢氧化铵 (25%水溶液)50g瓶

羊脾脏淋巴细胞分离液试剂盒200ml/KIT盒

S-8大孔吸附树脂500g瓶

Typhaneoside 香蒲新苷104472-68-620mg

AMPNa2 5-单二钠4578-31-820mg

Xylene Cyanol FF 二甲苯青FF1g瓶

透析袋 扁宽31 截留分子量3500-50000.5m/即用型管

羊抗人IgA1mg支

Acetylcholine chloride 化乙酰5g瓶

Rhodamine 罗丹明1235mg支

 


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