蛋白表达及纯化：

1.培养500ml哺乳动物细胞，然后将重组质粒转染到细胞中，通过瞬时表达产生目标蛋白。

2.收集含有目标蛋白的部分（细胞或培养上清）。

3.通过亲和，离子交换，疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白。

4.通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制最终产品质量。

5.通过Western-blot验证目标蛋白正确性。

交付内容：纯化好的目标蛋白及纯化报告?？砂纯突б筇峁┖炕昵?/span>Tag）或切除纯化标签（Tag）的最终蛋白，纯度最高可达90%以上。

产品属性：

英文名称：Recombinant Cyclin Dependent Kinase 4 (CDK4)

CMM3; PSK-J3; Cell division protein kinase 4

型号：GOY-01D432

酶与激酶

肿瘤免疫

物种：Homo sapiens (Human，人)

来源：原核表达

宿主E.coli

内毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法测定)

亚细胞定位：：细胞质

预测分子量：33.5kDa

实际分子量：33kDa(差异分析请参阅说明书)

片段与标签：Tyr6~Leu295 with N-terminal His Tag

缓冲液成份：PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.

性状：冻干粉

纯度：> 90%

等电点：6.7

应用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

规格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相关产品：

英文名称：Recombinant Glucosidase Alpha, Neutral AB (GaNAB)  产品名称：中性葡糖苷酶αAB(GaNAB)重组蛋白物种：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名称：Recombinant Glycogen Debranching Enzyme (AGL)  产品名称：糖原脱支酶(AGL)重组蛋白物种：Homo sapiens (Human，人)

英文名称：Recombinant Acyl Coenzyme A Oxidase 2, Branched (ACOX2)  产品名称：?；趸?(ACOX2)重组蛋白物种：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名称：Recombinant Acyl Coenzyme A Oxidase 2, Branched (ACOX2)  产品名称：酰基氧化酶2(ACOX2)重组蛋白物种：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名称：Recombinant Acyl Coenzyme A Oxidase 3, Pristanoyl (ACOX3)  产品名称：?；趸?(ACOX3)重组蛋白物种：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名称：Recombinant Coenzyme A Synthase (COASY)  产品名称：合酶(COASY)重组蛋白物种：Mus musculus (Mouse，小鼠)

操作步骤：

Ⅰ 实体组织蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂， 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。

2．  每100mg固体组织置于培养皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小块，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃匀浆器上下手动匀浆15次，注意低温操作；

3． 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管，离心10000转/分，4℃离心5 min；

4． 取上清转移至新的预冷的离心管中，即为全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。

Ⅱ 培养细胞蛋白提取

1． 贴壁培养的细胞，吸去培养基后，加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次，每次振摇数次以尽量去除培养液；

2． 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞，将细胞及培养液移至离心管中， 1000转/分离心10 min，再用10mL/150mm培养板的冷PBS，1000转/分离心5 min洗两次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂， 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。

4． 细胞洗涤后，转至新的预冷的离心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃摇床平台上，温和振荡15 min；

6． 14,000rpm，4℃离心15min，取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。

公司正在出售的产品：

CD39样蛋白1抗体 ENTPD2

磷酸化细胞外信号调节激酶5抗体 phospho-ERK5 (Thr218 + Tyr220)

真核翻译起始因子5抗体 EIF5

早期B淋巴细胞因子2抗体 EBF2

ELAVL2蛋白抗体 ELAVL2

ELAVL2+ELAVL4蛋白抗体 ELAVL2 + ELAVL4

同源盒蛋白转录因子EN1抗体 Engrailed 1

转录因子ER81蛋白抗体 ER81

真核翻译起始因子3K抗体 eIF3K

早期生长反应蛋白3抗体 EGR3

受体KA1抗体 EAA1

EMSY蛋白抗体 EMSY

周期素依赖性激酶4(CDK4)重组蛋白人大鼠小鼠杂合神经胶质瘤细胞英文名称：NG108-15

转铁蛋白受体(TFR)天然蛋白 英文名称：Native Transferrin Receptor (TFR)

人正常胎肝细胞英文名称：L-O2

胰月示-亚盐-环基础(TSC) 规格： 100g 用途： 用于食品和临床样本中产气荚膜梭菌的分离培养和计数(SN0177-92，ISO标准)。

人胃肠道间质瘤细胞英文名称：GIST

硫氧还蛋白还原酶1(TrxR1)重组蛋白英文名称：Recombinant Thioredoxin Reductase 1 (TrxR1)

BT-474(人腺导管细胞)5×106cells/瓶×2

BL培养基/BL Medium双岐杆菌分离培养250克国产/进口

再生蛋白1(NEO1)重组蛋白英文名称：Recombinant Neogenin 1 (NEO1)

NTM培养基/NTM Medium淋球菌的分离培养250克国产/进口

胃泌素(GT)重组蛋白英文名称：Recombinant Gastrin (GT)