产品属性：

英文名称：Recombinant A Disintegrin And Metalloprotease 10 (ADAM10)

CD156-C; CD156c; MADM; Kuz; CDw156; Kuzbanian protein homolog; Mammalian disintegrin-metalloprotease

型号：GOY-01D319

酶与激酶

肿瘤免疫

感染免疫

心脑血管

物种：Homo sapiens (Human，人)

来源：原核表达

宿主E.coli

内毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法测定)

亚细胞定位：：细胞膜, 细胞质, 高尔基体

预测分子量：25.4kDa

实际分子量：30kDa(差异分析请参阅说明书)

片段与标签：Arg420~Val641 with N-terminal His Tag

缓冲液成份：磷酸盐缓冲液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性状：冻干粉

纯度：> 90%

等电点：6.5

应用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

规格10μg50μg200μg1mg5mg

蛋白表达及纯化：

1.培养500ml哺乳动物细胞，然后将重组质粒转染到细胞中，通过瞬时表达产生目标蛋白。

2.收集含有目标蛋白的部分（细胞或培养上清）。

3.通过亲和，离子交换，疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白。

4.通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制最终产品质量。

5.通过Western-blot验证目标蛋白正确性。

交付内容：纯化好的目标蛋白及纯化报告?？砂纯突б筇峁┖炕昵?/span>Tag）或切除纯化标签（Tag）的最终蛋白，纯度最高可达90%以上。
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操作步骤：

Ⅰ 实体组织蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂， 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。

2．  每100mg固体组织置于培养皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小块，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃匀浆器上下手动匀浆15次，注意低温操作；

3． 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管，离心10000转/分，4℃离心5 min；

4． 取上清转移至新的预冷的离心管中，即为全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。

Ⅱ 培养细胞蛋白提取

1． 贴壁培养的细胞，吸去培养基后，加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次，每次振摇数次以尽量去除培养液；

2． 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞，将细胞及培养液移至离心管中， 1000转/分离心10 min，再用10mL/150mm培养板的冷PBS，1000转/分离心5 min洗两次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂， 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。

4． 细胞洗涤后，转至新的预冷的离心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃摇床平台上，温和振荡15 min；

6． 14,000rpm，4℃离心15min，取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。

公司正在出售的产品：

6号染色体开放阅读框62抗体 C6orf62

6号染色体开放阅读框58抗体 C6orf58

6号染色体开放阅读框70抗体 C6orf70

6号染色体开放阅读框72抗体 C6orf72

7号染色体开放阅读框13抗体 C7orf13

7号染色体开放阅读框29抗体 C7ORF29

8号染色体开放阅读框72抗体 C8orf72

7号染色体开放阅读框30抗体 C7orf30

7号染色体开放阅读框36抗体 C7orf36

7号染色体开放阅读框42抗体 C7orf42

7号染色体开放阅读框57抗体 C7orf57

7号染色体开放阅读框43抗体 C7ORF43

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香菇 Lentinula edodes嗜酸杆菌 Lactobacillus acidophilus

人胃细胞栗色浑圆链霉菌 Streptomyces castaneoglobosus

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人关节软骨细胞培养基G1(发绿色荧光的小鼠胚胎干细胞)

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无花果曲霉 Aspergillus ficuum泡盛曲霉 Aspergillus awamori

腊状芽胞杆菌 Bacillus cereus毛柄金钱菌(金针菇) Flammulina velutipes

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