蛋白表达及纯化：

1.培养500ml哺乳动物细胞，然后将重组质粒转染到细胞中，通过瞬时表达产生目标蛋白。

2.收集含有目标蛋白的部分（细胞或培养上清）。

3.通过亲和，离子交换，疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白。

4.通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制最终产品质量。

5.通过Western-blot验证目标蛋白正确性。

交付内容：纯化好的目标蛋白及纯化报告?？砂纯突б筇峁┖炕昵?/span>Tag）或切除纯化标签（Tag）的最终蛋白，纯度最高可达90%以上。

产品属性：

产品名称：组织蛋白酶K(CTSK)重组蛋白猪

英文名称：Recombinant Cathepsin K (CTSK)

CTS-K; CTS02; CTSO; CTSO1; CTSO2; PKND; PYCD; Pycnodysostosis; Cathepsin O; Cathepsin X

型号：GOY-01D157

酶与激酶

感染免疫

骨骼代谢

物种：Sus scrofa; Porcine (Pig，猪)

来源：原核表达

宿主E.coli

内毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法测定)

亚细胞定位：：Lysosome. Secreted

预测分子量：57.3kDa

实际分子量：55kDa(差异分析请参阅说明书)

片段与标签：Lys90~Ala318 (Accession # Q9GLE3) with N-terminal His and GST Tag

缓冲液成份：磷酸盐缓冲液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性状：冻干粉

纯度：> 95%

等电点：7.9

应用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

规格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相关产品：

英文名称：Recombinant Peptidyl Arginine Deiminase Type IV (PADI4)  产品名称：肽基脱亚氨酶Ⅳ(PADI4)重组蛋白物种：Homo sapiens (Human，人)

英文名称：Recombinant Peptidyl Arginine Deiminase Type VI (PADI6)  产品名称：肽基脱亚氨酶Ⅵ(PADI6)重组蛋白物种：Homo sapiens (Human，人)

英文名称：Recombinant Pantothenate Kinase 4 (PANK4)  产品名称：泛酸激酶4(PANK4)重组蛋白物种：Homo sapiens (Human，人)

英文名称：Recombinant Phosphoglucomutase 5 (PGM5)  产品名称：葡萄糖磷酸变位酶5(PGM5)重组蛋白物种：Homo sapiens (Human，人)

英文名称：Recombinant Peroxiredoxin 4 (PRDX4)  产品名称：过氧化还原酶4(PRDX4)重组蛋白物种：Homo sapiens (Human，人)

英文名称：Recombinant Peroxiredoxin 4 (PRDX4)  产品名称：过氧化还原酶4(PRDX4)重组蛋白物种：Mus musculus (Mouse，小鼠)

操作步骤：

Ⅰ 实体组织蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂， 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。

2．  每100mg固体组织置于培养皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小块，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃匀浆器上下手动匀浆15次，注意低温操作；

3． 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管，离心10000转/分，4℃离心5 min；

4． 取上清转移至新的预冷的离心管中，即为全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。

Ⅱ 培养细胞蛋白提取

1． 贴壁培养的细胞，吸去培养基后，加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次，每次振摇数次以尽量去除培养液；

2． 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞，将细胞及培养液移至离心管中， 1000转/分离心10 min，再用10mL/150mm培养板的冷PBS，1000转/分离心5 min洗两次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂， 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。

4． 细胞洗涤后，转至新的预冷的离心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃摇床平台上，温和振荡15 min；

6． 14,000rpm，4℃离心15min，取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。

公司正在出售的产品：

抗菌肽/天蚕素抗体 Cecropin

肌动蛋白结合蛋白CORO1A抗体 Coronin 1a

钙/钙调蛋白依赖蛋白激酶IG抗体 Camk1g

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趋化素样因子超家族成员2抗体 CMTM2

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囊性纤维化跨膜转运调节因子抗体 CFTR

酪蛋白激酶2相互作用蛋白1抗体 CKIP-1

α-s1酪蛋白抗体 Alpha s1 Casein

CIDEB抗体 CIDEB

CD40L抗体 CD40L

高密度脂蛋白受体/清道夫受体抗体 Scavenging Receptor SR-BI

组织蛋白酶K(CTSK)重组蛋白猪鼠李糖杆菌 Lactobacillus rhamnosus

盐水球菌 Salinococcus sp.

NCI-H2227(人小细胞肺细胞)5×106cells/瓶×2

热带假丝酵母 Candida tropicalis

苏云金芽胞杆菌蜡螟亚种 Bacillus thuringiensis subsp. galleriae

费氏中华根瘤菌 Sinorhizobium fredii猴菌

杆菌属 Lactobacillus sp.豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

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小鼠肺细胞英文名称：

AsPC-1(人胰腺细胞)5×106cells/瓶×2

中慢生华癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii

小鼠成肌细胞泡盛曲霉 Aspergillus awamori

毛柄金钱菌(金针菇) Flammulina velutipes根瘤菌 Rhizobium sp.