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小鼠杂交瘤细胞;AE-2价格质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
小鼠杂交瘤细胞;AE-2价格操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液??刂拼荡虻牧Χ?,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 悬浮生长
特征特性 动物用纯化的人红细胞乙酰胆碱脂酶免疫。 脾细胞与gp2/O-Agl4骨髓瘤细胞融合。 产生的抗体与人及猴的乙酰胆碱脂酶结合,但反应位点与AE-1(ATCC HB-72)的抗原决定簇不同。 检测发现短肢畸形(鼠痘)病毒阴性。
培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 优质胎牛血清,10%
传代方法 1:2。3天内可长满。
传代情况 PN5
冻存条件 *培养基+8%DMSO
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 A类
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
Leukotriene C4 (50 ug)5S-hydroxy-6R-(S-glutathionyl)-7E,9E,11Z,14Z-eicosatetraenoic acid; LTC4; Leukotriene C4
11-dehydro Thromboxane B2-d4 (100 ug)9。alpha。,15S-dihydroxy-11-oxothromba-5Z,13E-dien-1-oic-3,3,4,4-d4 acid; 11-keto TXB2-d4; 11-dehydro Thromboxane B2-d4
12(S)-HETE (25 ug)12S-hydroxy-5Z,8Z,10E,14Z-eicosatetraenoic acid; 12(S)-HETE
9(R)-HODE (50 ug)9R-hydroxy-10E,12Z-octadecadienoic acid; 9(R)-HODE
96-Well Solid Plate (white) (1 ea)96-Well Solid Plate (white)
Cortisol Express AChE Tracer (100 dtn)Cortisol Express AChE Tracer
8-Isoprostane EIA Standard (1 ea)8-epi Prostaglandin F2α|8-iso Prostaglandin F2α; 8-Isoprostane EIA Standard
13(S)-HpOTrE(γ) (500 ug)13S-hydroperoxy-6Z,9Z,11E-octadecatrienoic acid; 13(S)-HpOTrE(γ)
Anti-Interleukin-2 (human) EIA Strip Plate (1 ea)Anti-Interleukin-2 (human) EIA Strip Plate
Cell-Based Assay Soluble Epoxide Hydrolase Inhibitor (10 mM) (5 ea)CBA sEH Inhibitor (10 mM); Cell-Based Assay Soluble Epoxide Hydrolase Inhibitor (10 mM)
Tris-Borate EDTA Stock Solution (5X, pH 8。0) (500 mL)TBE Buffer; Tris-Borate EDTA Stock Solution (5X, pH 8。0)
PAF C-16 (100 mg)1-O-hexadecyl-2-O-acetyl-sn-glyceryl-3-phosphorylcholine; Plaet-activating Factor C-16; PAF C-16
2-Arachidonoyl Glycerol (10 mg)5Z,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenoic acid, 2-glyceryl ester; 2-AG; 2-Arachidonoyl Glycerol
Oleyl Trifluoromethyl Ketone (10 mg)1,1,1-trifluoro-10Z-nonadecen-2-one; OTK|Heptadecyl Trifluoromethyl Ketone; Oleyl Trifluoromethyl Ketone
Sodium Phosphate Assay Buffer (10 ml)Sodium Phosphate Assay Buffer
SIRT6 (human recombinant) Direct Assay Reagent (1 ea)SIRT6 (human recombinant); SIRT6 (human recombinant) Direct Assay ReagentDenhardt 溶液,50×100mL
大提柱式植物 DNAout4次
甲酰胺嘧啶 [fapy]-DNA 糖基化酶500U
CAS62625-32-5溴甲酚绿1g
12-213X33 酵母菌种1mL
一站式 GST 标记蛋白质微量纯化套装20 次
克必隆 eTS PCR 法 cDNA 合成试剂盒10 次
糖原Ⅱ型1g
MEM 培养基 ( 含 1% 双抗 +10% 小牛血清 )500mL
DNA Tris HCl,1M,pH8.5100mL
140624-20双染细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-PE·7-AAD) 20 次
90602F-50DNA 电泳分子量标准 (3)λ/EcoR I+ Hind III50 次
十二烷基磺酸清除剂25mL
动态显色法内毒素定量试剂盒48 次
三 ( 羟甲基 ) 氨基甲烷盐100g
Sephacryl S-400 基质10mL
CAS9001-62-1脂肪酶5g
100539-1胰凝乳蛋白酶抑制剂溶液,20mg/mL1mL
柱式酵母 DNAout50 次
MMLV 逆转录酶 (H-)1000U
apo- 转铁蛋白10mg
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