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检测转化细胞增殖Z准确可靠的方法

时间:2018-3-21阅读:295
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检测DNA合成是目前检测转化细胞增殖zui准确可靠的方法,目前常用的方法有如下几种:
(1)3H-胸腺嘧啶核苷渗入法(3H-TdR):胸腺嘧啶核苷(TdR)是DNA合成的前体物,处于S期的细胞不断地摄取TdR用以合成DNA。3H-TdR掺入法是将被放射性标记的3H-TdR掺入DNA合成期的细胞,细胞内3H-TdR掺入量的多少可客观反映细胞复制DNA能力的大小,从而问接了解细胞增殖情况。通过检测。H放射活性即可反映DNA含量。
1976年Mattem等首先采用此方法做体外药敏试验。此后经过长期的广泛研究,也己证实该法对各种动物肿瘤及人类肿瘤均有较好的预测价值和重复性,主要用于细胞增殖的检测与药物敏感性试验等。但这种方法操作复杂,试剂含有同位素,具有放射性,对实验者有一定的危害,故限制了它的应用。
(2)BrdU检测法:BrdU中文全名为5-溴脱氧尿嘧啶核苷,为胸腺嘧啶的衍生物,可代替胸腺嘧啶在DNA合成期(S期)掺入,而后利用抗BrdU的抗体耦联不同的酶,加入不同发光特性的底物,然后再通过比色法、化学发光检测或荧光信号检测底物强度等步骤,反映BrdU的掺入量。该方法不需要再和放射性物质打交道。
(3)EdU检测法:BrdU虽然解决了接触同位素的问题,但该方法需要变性DNA后才能与抗体结合,但这就破坏了DNA双链结构,对某些后续或同时进行的试验,如其他染料的结合染色有影响。现在有一种新的检测方法能避免这种情况的发生——EdU检测。EdU(5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷)也是一种胸腺嘧啶核苷类似物,但其连有的炔羟基团在天然化合物中很少见,在转化细胞增殖时能够插入正在复制的DNA分子中,基于EdU与染料的共轭反应可以进行快速的细胞增殖检测分析,可以有效地检测处于S期的细胞百分数。与传统的免疫荧光染色(BrdU)检测方法相比,更简单,更快速,更准确。
鉴别    含量:    进口/国产    组氨酸    20mg/支    英文名称    110890-200001    规格:
鉴别    含量:    进口/国产    黄山药皂苷提取物    20mg/支    英文名称    110891-200001    规格:
含量测定    含量:    进口/国产    积雪草苷    20mg/支    英文名称    110892-200604    规格:
鉴别    含量:    进口/国产    羟基积雪草苷    20mg/支    英文名称    110893-200201    规格:
含量测定    含量:    进口/国产    甜菜碱    20mg/支    英文名称    110894-200503    规格:
含量测定    含量:    进口/国产    雪上一枝蒿甲素    20mg/支    英文名称    110895-200303    规格:
鉴别    含量:    进口/国产    琥珀酸    20mg/支    英文名称    110896-200001    规格:
含量测定    含量:    进口/国产    α-蒎烯    20mg/支    英文名称    110897-200001    规格:
含量测定    含量:    进口/国产    γ-亚麻酸甲酯    20mg/支    英文名称    110898-200503    规格:
转化细胞

 

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