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近來的趙老師在操作小鼠elisa檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)的時(shí)分發(fā)現(xiàn)了一個(gè)問題,所以來電我公司的售后部分問道:加完顯色液(購買)顯色必定時(shí)刻后,再加停止液(2M H2SO4,自己)后,當(dāng)即測(cè)驗(yàn)其吸光度值,等過幾分鐘再測(cè)驗(yàn)吸光度值,發(fā)現(xiàn)兩次測(cè)得的吸光度值發(fā)作衰減。第2次均小于*次。而且,加停止液時(shí),從*條加到第12條后,測(cè)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),吸光度值從1-12條逐級(jí)衰減。條件是這12條酶標(biāo)板都是同一種產(chǎn)品,而且包被相同蛋白。
ELISA試劑盒通過我公司技能專員的剖析,本來ELISA吸光度值衰減能夠這樣奇妙應(yīng)對(duì)。
其實(shí)詳細(xì)的原因也很簡(jiǎn)單,有可能是顯色液的質(zhì)量不夠好。一般情況下,停止反響后OD值的下降前期不是很明顯。停止后,吸光度值是會(huì)跟著時(shí)刻衰減,所以一般是加完停止液后當(dāng)即測(cè),這樣比較準(zhǔn)。再次剖析12條顯示逐級(jí)遞減的原因看看是否是:
① 顯色時(shí)刻調(diào)整,如果你現(xiàn)在的顯色時(shí)刻是10MIN,那調(diào)整到30MIN,再加停止液,觀察上述現(xiàn)象是否出現(xiàn)。
② 停止液中加入少量甘油看下怎么樣。建議您運(yùn)用RD品牌的ELISA試劑盒,顯色時(shí)刻是30分鐘,停止后要求在30分鐘內(nèi)檢測(cè),加入停止液后,在加入停止液后2到3分終內(nèi)檢測(cè),這是OD值相對(duì)比較高。擬合值能達(dá)到四個(gè)9。
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