實(shí)驗(yàn)方法原理

體外培養(yǎng)轉(zhuǎn)化細(xì)胞生長(zhǎng)、分裂繁殖的能力，可用分裂指數(shù)來表示。它與生長(zhǎng)曲線有一定的，如隨著分裂指數(shù)的不斷提高，細(xì)胞也就進(jìn)入了指數(shù)生長(zhǎng)期。

分裂指數(shù)指細(xì)胞 群體中分裂細(xì)胞 所占的百分比，它是測(cè)定細(xì)胞 周期的一個(gè)重要指標(biāo)，也是不同實(shí)驗(yàn)研究選擇細(xì)胞的重要依據(jù)。

實(shí)驗(yàn)材料

細(xì)胞

試劑、試劑盒

胰酶甲醇培養(yǎng)液冰醋酸Giemsa染液

儀器、耗材

CO2培養(yǎng)箱普通顯微鏡培養(yǎng)皿蓋玻片吸管
實(shí)驗(yàn)步驟

一、消化細(xì)胞 ，將細(xì)胞 懸液接至內(nèi)含蓋玻片的培養(yǎng)皿中。

二、CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48小時(shí)，使細(xì)胞長(zhǎng)在蓋片上。

三、取出蓋片，按下列順序操作：

PBS漂洗3分鐘→甲醇：冰醋酸=3：1固定液中固定30分鐘→Giemsa液染色10分鐘→自來水沖洗。

四、蓋片晾干后反扣在載玻片上，鏡檢。

五、計(jì)算

分裂指數(shù)=分裂細(xì)胞 數(shù)/總細(xì)胞 數(shù)×100%

收起 

注意事項(xiàng)

1.  操作時(shí)動(dòng)作要輕，以免使蓋片上的轉(zhuǎn)化細(xì)胞脫落。

 phospho-AMPK beta 1(Ser182) 巨噬細(xì)胞炎癥蛋白18抗體

 phospho-AMPK gamma 1 (Tyr307) 巨噬細(xì)胞炎性蛋白抗體

 phospho-AMPK gamma 1 (Tyr308) 巨噬細(xì)胞炎性蛋白20抗體

 phospho-ANAPC1 (Ser355) 巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β抗體

 phospho-ANAPC1(Ser377) 巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α抗體

 phospho-Androgen Receptor (Ser210) 巨噬細(xì)胞炎性蛋白19抗體

 phospho-Androgen Receptor (Ser213) 巨噬細(xì)胞炎性蛋白16抗體

 phospho-Androgen Receptor (Ser580) 巨噬細(xì)胞炎性蛋白15

 phospho-Androgen Receptor (Ser595) 巨噬細(xì)胞清道夫受體抗體

 phospho-Androgen Receptor (Ser650) 巨噬細(xì)胞克隆刺激因子抗體
轉(zhuǎn)化細(xì)胞