猪口蹄抗原(区分野毒与疫苗毒)ELISA试剂盒

1. 血清标本收集、处理、保存方法：

用无热原、无内毒素的试管或离心管采集血液标本，全血标本室温放置1－2 h或4℃隔夜，然后4℃、3000 rpm/min离心20 min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（较长时间），避免反复冻融。避免使用溶血或高血脂的标本。

2. 血浆标本收集、处理、保存方法：

根据样本要求选择EDTA或肝素钠或枸缘酸钠作为抗凝剂，用含抗凝剂的采血管或离心管采集血液标本，室温混合20 min左右，然后4℃、3000 rpm/min离心20 min，小心收集上清即为血浆。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（较长时间），避免反复冻融。避免使用溶血或高血脂的标本。

3. 尿液标本收集、处理、保存方法：

用干净容器收集尿液，4℃、3000 rpm/min离心20 min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（较长时间），避免反复冻融。

4. 唾液标本收集、处理、保存方法：

用干净离心管收集唾液，4℃、3000 rpm/min离心20 min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（较长时间），避免反复冻融。

5. 细胞标本收集、处理、保存方法:

（1）细胞培养上清

 取细胞培养上清到干净离心管中，4℃、3000 rpm/min离心20 min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（较长时间），避免反复冻融。

（2）细胞裂解液

收集细胞培养液，4℃、3000 rpm/min离心20 min，弃去上清，用预冷的PBS（0.01M，PH 7.4）洗涤三次。加入适量的预冷PBS或细胞裂解液（临用前加入蛋白酶抑制剂）重悬细胞。通过反复冻融，使细胞充分裂解。然后4℃、10000 rpm/min离心20 min，除去细胞碎片，取上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（较长时间），避免反复冻融。

6. 植物标本收集、处理、保存方法：

取适量大小组织块（一般0.2－0.5 g），用预冷的PBS缓冲液（0.01M，PH 7.4）漂洗三次，滤纸拭干水分。准确称重，放入匀浆管中，加入4倍体积的匀浆介质（0.05 mol/L Tris-HCl，pH 7.4 PBS缓冲液）于匀浆管中，冰水浴条件下，剪碎组织块，手工匀浆或机器匀浆，制成匀浆液。4℃、10000 rpm/min离心20 min，取上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（较长时间），避免反复冻融。

7. 粪便标本收集、处理、保存方法：

采集时用干净的竹签挑取粪便样本到离心管中，向离心管中加入适量PBS缓冲液（0.01M，PH 7.4），搅拌均匀。然后4℃、10000 rpm/min离心20 min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（较长时间），避免反复冻融。

8. 组织标本收集、处理、保存方法：

将组织样本用PBS缓冲液（0.01M，PH 7.4）冲洗，洗去组织表面残留的血液或杂质。将组织块称重，记录后剪碎（碎块尽量小）。将组织按一定的比例（通常组织重量：PBS体积=1：9）加入预冷的PBS缓冲液（临用前加入蛋白酶抑制剂）中匀浆，匀浆时置于冰上。吸取匀浆液到离心管中，4℃、10000 rpm/min离心20 min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（较长时间），避免反复冻融。

猪口蹄抗原(区分野毒与疫苗毒)ELISA试剂盒

1．ELISA试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

4．请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔*孔的OD值)，请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定，计算时请zui后乘以总稀释倍数(×n×5)。

5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物请避光保存。

猪口蹄抗原(区分野毒与疫苗毒)ELISA试剂盒

1. 灵敏度：有二层含义，1）为试剂检出被检物质的zui低量的能力；2）为试剂对大量样品中阳性检出的能力。2. 特异性：常用交叉反应率表示。其越高说明特异性越好。 

3. 精密度：ELISA试剂一般指其批内CV，其值应小于15%；定量试剂应同时考察线性范围

4. 稳定性：试剂在规定条件下能储存的时间，一般采用破坏性试验即将试剂存放于37℃保存，定期测定其灵敏度，特异性和精密度等指标，直到其质量指标开始下降为止，通常认为37℃每稳定一天相当于4-10℃保存一个半月。 

5. 简便性：指在不影响试剂的前三项指标的前题下，实验和测定步骤越少越好，在定性试验中结果判断简单明了，定量试验结果计算也应简单。

6. 安全性：指试剂对操作者和环境安全无害无传染性。 

7. 经济性：试剂在同等质量条件下通过大规模生产或技术进步降低成本而市场价格比较合理。 

试剂评价：需要有的确证方法确证的样品进行检测，一般实验室不易取得此类样品，每新购进一次试剂评价也很麻烦。可以通过间接的回收实验对试剂进行选择