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農(nóng)藥殘留量快速檢測(cè)-酶抑制率法(分光光度法)

在一定條件下，有機(jī)磷和氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥對(duì)膽堿酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率與農(nóng)藥的濃度呈正比。正常情況下，酶催化神經(jīng)傳導(dǎo)代謝產(chǎn)物（乙酰膽堿）水解，其水解產(chǎn)物與顯色劑反應(yīng)，產(chǎn)生黃色物質(zhì)，用分光光度計(jì)在412nm處測(cè)定吸光度隨時(shí)間的變化值，計(jì)算出抑制率，通過(guò)抑制率可以判斷出樣品中是否有高劑量有機(jī)磷或氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥的存在。

試劑

*pH8.0緩沖溶液分別取11.9g無(wú)水磷酸氫二鉀與３.２g磷酸二氫鉀，用1000mL蒸餾水溶解。

*顯色劑分別取160mg二硫代二硝基苯甲酸（DTNB）和15.6mg碳酸氫鈉，用20mL緩沖溶液溶解，4℃冰箱中保存。

*底物：取25.0mg硫代乙酰膽堿，加3.0mL蒸餾水溶解，搖勻后置4℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

*乙酰膽堿酯酶根據(jù)酶的活性情況，用緩沖溶液溶解，3min的吸光度變化ΔA0值應(yīng)控制在0.3以上。搖勻后置4℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>