18f/99mtc/125l/68Ga放射同位素標記小分子/抗體復合物

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           西安齊岳生物科技有限公司是國內主要的穩定性同位素標記產品供應商，合成一些列同位素標記的小分子或產品，我們自產的產品包括有氘標記的化合物，N-15無機標記化合物，N-15有機標記化合物，N-15生物標記化合物，C-13標記化合物以及氘標記的科研或小分子劑,我們還可以提供一系列18f、99mtc、125l、68Ga定制合成的放射性同位素標記產品。

放射性同位素標記/radioisotope labeling

用于同位素標記的示蹤原子為放射性同位素的標記/同位素示蹤利用放射性核素化合物

同位素標記法/示蹤元素標記

同位素標記法：同位素可用于追蹤物質的運行和變化規律。借助同位素原子以研究有機反應歷程的方法。即同位素用于追蹤物質運行和變化過程時，叫做示蹤元素。用示蹤元素標記的化合物，其化學性質不變。科學家通過追蹤示蹤元素標記的化合物，可以弄清化學反應的詳細過程。這種科學研究方法叫做同位素標記法。同位素標記法也叫同位素示蹤法。

基本原理

同位素示蹤所利用的放射性核素（或穩定性核素）及它們的化合物，與自然界存在的相應普通元素及其化合物之間的化學性質和生物學性質是相同的，只是具有不同的核物理性質。因此，可以用同位素作為一種標記，制成含有同位素的標記化合物（如標記食物，科研和代謝物質等）代替相應的非標記化合物。利用放射性同位素不斷地放出特征射線的核物理性質，可以用核探測器追蹤它在體內或體外的位置、數量及其轉變等，穩定性同位素雖然不釋放射線，但可以利用它與普通相應同位素的質量之差，通過質譜儀，氣相層析儀，核磁共振等質量分析儀器來測定。放射性同位素和穩定性同位素都可作為示蹤劑（tracer），但是，穩定性同位素作為示蹤劑其靈敏度較低，可獲得的種類少，價格較昂貴，其應用范圍；而用放射性同位素作為示蹤劑不靈敏度，測量方法簡便易行，能地定量，地定位及符合所研究對象的生理條件等特點：

靈敏度高

放射性示蹤法可測到 10-14－10-18克水平，即可以從 1015 個非放射性原子中檢出一個放射性原子。它比日前較敏感的重量分析天平要敏感 108~107 倍，而迄今較的化學分析法很難測定到 10~12 克水平。

方法簡便

放射性測定不受其它非放射性物質的干擾，可以省略許多復雜的物質分離步驟，體內示蹤時，可以利用某些放射性同位素釋放出穿透力強的 r 射線，在體外測量而獲得結果，這大大簡化了實驗過程，做到非性分析，隨著液體閃爍計數的發展，14C 和 3H 等發射軟 β 射線的放射性同位素在醫學及生物學實驗中得到越來越的應用。

定位定量

放射性同位素示蹤法能定量地測定代謝物質的轉移和轉變,與某些形態學相結合（如病理切片，電子顯微鏡等），可以確定放射性示蹤劑在中的定量分布，并且對的定位度可達細胞水平、亞細胞水平乃至分子水平。

符合生理條件

在放射性同位素實驗中，所引用的放射性標記化合物的化學量是極微量的，它對體內原有的相應物質的重量改變是微不足道的，體內生理過程仍保持正常的平衡狀態，獲得的分析結果符合生理條件，更能反映客觀存在的事物本質。 放射性同位素示蹤法的優點如上所述，但也存在一些缺陷，如從事放射性同位素工作的人員要受的訓練，要具備相應的防護措施和條件，在日前個別元素（如氧、氮等）還沒有合適的放射性同位素等等。在作示蹤實驗時，還注意到示蹤劑的同位素效應和放射效應問題。所謂同位素效應是指放射性同位素（或是穩定性同位素）與相應的普通元素之間存在著化學性質上的微小差異所引起的個別性質上的區別，對于輕元素而言，同位素效應比較嚴重。因為同位素之間的質量判別是倍增的，如 3H 質量是 1H 的三倍，2H 是 1H 的兩倍，當用氚水（3H2O）作示蹤劑時，它在普通 H2O 中的含量不能過大，否則會使水的物理常數、對細胞膜的滲透及細胞質粘性等都會發生改變。但在一般的示蹤實驗中，由同位素效應引起的誤差，常在實驗誤差內，可忽略不計。放射性同位素釋放的射線利于追蹤測量，但射線對生物體的作用劑量時，會改變機體的生理狀態，這是放射性同位素的輻射效應，因此放射性同位素的用量應小于劑量，嚴格控制在生物機體所能允許的范圍之內，以免實驗對象受輻射損傷，而得錯誤的結果。

二、標記實驗的設計原則

設計一個放射性同位素的標記實驗應從實驗的目的性，實驗所具備的條件和對放射性的防護水平三方面著手考慮。原則上從兩個主要方面來設計放射性標記實驗：一是尋求的、可重復的測定放射性強度的條件，二是選擇一個合適的比活度 λqδ（單位是原子/時間/分子，dpm/mol或ci/mol）。其中，λ=-dN’dt/N’為該處放射性原子核的衰變常數。q=N ’/n’，表示 n’ 個該化學形式分子為N’個放射性原子所標記。δ=n’/n 表示放射性標記的分子數 n’ 與總分子數（標記的加未標記的）n 之比。采用放射性同位素標記來實現所研究課題預期目的或一部分，一般須經過實驗準備階段，實驗階段和放射性處理三個步驟。

（一）實驗準備階段

1、標記劑的選擇

選定放射性標記劑的比活度 λqδ 的值足夠大，以實驗所需要的靈敏度，而又要盡可能地小，使得在該實驗條件下輻射自分解可忽略。一般情形是根據實驗目的和實驗周期長短，來選擇具有合適的衰變方式，輻射類型和半衰期，且放射性低的放射性同位素。如今已確定的放射性核素包括的 58 種和人工制造的約 1300 種，其中大多數不常能用作放射性標記劑。主要原因是制備困難、半衰期不合適及放射性不定量。在一種生產方法中，生產步驟很可能包含或多或少的化學處理，因而標記實驗人員需要了解某個核素及其周圍的那些元素的化學性質，因為它們有可能成為此放射性同位素的雜質。

放射性同位素都衰變（經過或不經過中間狀態）到處于基態的子體核素，衰變時伴隨形式的能量輻射，如 α、β-、β+、γ、X 放射等。在選擇標記劑時，標記實驗人員要仔細研究衰變綱圖，根據實驗條件和計數條件來決定那一種輻射，在衰變綱變內，核能級的兩條水平線之間和距離表示能量差，↑ 或 ↓ 表示能級同伴隨原子序數增或減少的能量，↓ 表示從激發態至基態的同質異能躍遷。一般要選擇較適宜的半衰期 τ 的放射性同位素，使 τ 足夠長，從而使衰變校正有意義或干脆不必作衰變校正，同時又要足夠短，能較地進行標記實驗，并使得放射性容易處理，在實際工作中，使用的放射性同位素的半衰期應該與實驗需要持續的時間 t 相適應，如對于某個實驗，t/τ=0.04 時，應所選放射性同位素的衰變校正為 3.5%；而 t/τ=0.10 時，應選放射性同位素的衰變校正為 6.6%。t/τ=0.15 時，應選用其衰變校正為 10%。

在體外標記條件，一般選用半衰期較長而射線強度適中，既利于探測，又易于防護和保存的放射性標記劑。體內標記條件下，若實驗周期短，應選用半衰期短，且能放出強度 r 射線物放射性同位素，若實驗周期長，如需要將動物活殺后對臟器分別測定的，則應選用半衰期較長放射性同位素。此外，根據實驗目的來選用定位的或不定位的標記標記劑，例如研究氨基酸的脫羧反應，14C 應標記在羧基上，只有這種定位標記的氨基酸，才能在脫羧后產生 14CO2。而有些實驗不要求某些位置標記，只須均勻標記即可。

選擇放射性標記劑還同時滿足高化學純度，高放射性核純度的要求。在標記劑制備期間、貯存期間以用試驗體系中所使用的溶劑、化學試劑、酶等可能會產生化學雜質、放射化學雜質及輻射自分解引起的放射性雜質，這些雜質的存在，使得標記實驗中使用的標記劑不“純”，而或多或少影響實驗的結果，甚至會導致錯誤結論。 氚標記的胸腺嘧啶核苷（3H－TdR）和尿嘧啶核苷（3H－UR）是兩種常用的標記劑，前者地結合到DNA中，后者則摻入到RNA中，它們的輻射分解速度隨比較放射性的及保存時間的延長而增加，在不同溫度和不同溶液中的穩定性也不同。經保存八年的 3H-TdR 約有 35% 輻射分解為 3H－胸腺嘧啶，并導致二醇和水合物的形式，在實驗中這雜質會很快摻入細胞并與大分子（很可能是）結合，而不是與 DNA 和 RNA 相結合，這些雜質用 DNA 酶和 RNA 酶處理細胞除去。3H－TdR和3H－UR 貯存在 -20℃ 的冷凍溶液中輻射分離速度要比 +2℃ 增加 3~4 倍，但低溫度（-140℃）對貯存也有利，在允許對標記實驗人員在選擇保存放射性標記劑時會有所啟發。

2、放射性同位素測量方法的選擇

測量方法的選擇取決于射線種類，對于α射線通常可用硫化鋅晶體、電離室、核乳膠等方法探測；對能量高的 β射線可用云母窗計數管、塑料閃爍晶體及核乳膠測定，對于能量低的β射線可用液體閃爍計數器測量：對于 γ射線則用 G-M 計數管，閃爍晶體探測。日前大多數實驗室主要采用晶體閃爍計數法和液體閃爍計數法兩種測量方式。

同一臺探測儀器對不同量的標記劑具有不同的較佳工作條件，在實驗準備階段要檢查探測器是否已調有所用標記同位素的工作條件，否則需要用量的標記劑作為放射源（或選用該同位素的標準源），把探測器的較佳工作條件調整好，并且要探測器性能處于穩定的狀態。

探測較佳工作條件的選擇方法：一種是測“坪曲線”，另一種是找較好的因素。對于光電倍增管，在理論上不存在“坪”（plateau）。但隨著高壓的增加，在范圍內，脈沖數變化較小，形成一段坡度較小的電壓脈沖曲線，通常也稱其為坪。測坪曲線的方法：固定放射源，根據其射線能量的大小，初選 一個廣大器增益（放大倍數）和甄別器閾值。不斷地改變高壓（由低到高，均勻增加伏度），每改變一次高壓，都測定一次本底和放射源的計數率，較后作出高壓本底計數率和高壓放射源計數曲線。用同樣的方法，作另一個甄別閾值（放大倍數不變）下的高壓計數率曲線，這樣反復多作幾條曲線。時，還可固定甄別閾值，改變放大倍數，求出高壓計數率曲線。應選擇“坪”比較平坦的曲線工作條件：甄別閾值和放大增益，作為正式測定時間的儀器工作條件，高壓值應選擇在該“坪”中點偏向起始段一邊相應的高壓值。因素，又稱為優值，是指在條件下，要合適的統計數目所需要的時間是儀器的計數效率E和本底計數Nb的函數： 因素 F=E2/Nb 它是衡量一臺計數器性能的指標，儀器的因素F應該越大越好，因素F越大，表示測量效率E越高而本底Nb越小。如果某放射性標記的標準源存在來源困難等問題的話，可以用相對因素f來代替。 相因素 f=ns/nb 式中ns指某種放射性樣品的計數率。找較好因素的方法與測坪曲線一樣，作出幾條高壓－F（或 f）的關系曲線，在幾條曲線中選擇峰值較高的曲線。這根曲線的峰值所對應的條件：高壓，甄別閾，放大倍數等，是該儀器對被測同位素的較佳工作條件。較佳因素不恰好落在“坪”上，有的在“坪”附近，有的卻在“坪”的下端。著眼于把同位素的整個能譜峰都計下來的標記實驗者主張取“坪”所對應的工作條件，而著眼于優值者，主張取較佳因素所對應的工作條件，也有人衷。如果某儀器本底很低，光電倍增管噪音很低和能譜分辯高，二者應該相差不大。同一臺儀器的較佳工作條件，隨儀器的使用期延長而有所改變，不同的放射性同位素，其較佳工作條件不同。因此核探測儀器的較佳工作條件具有專屬性，并且要經常通過選擇其不同時期的較佳工作條件。更不能不問被測同位素的種類，而千篇一律地使用同一個工作條件。

為了地計數，可以長時間一次計數，或短時間多次測量，兩者的標準誤基本相同，為避免外界因素的影響，在實際工作中，取短時間多次測量較為合理適用。在測量樣品的放射性時，本底是一個重要影響因素。本底高，則標準誤和標準誤差都增大，在樣品計數較低時，本底對標準誤和標準誤差的影響愈大，從而影響實驗結果的精度，而且為了的精度，勢別要增加樣品的測量時間。根據核衰變的統計規律，在實驗中如果樣品數量少，選擇 tN=1.4tb 的比例（式中tN為樣品放射性測量時間，tb 為本底測量時間）較為合理；如果樣品數量較多是一大批樣品，則延長本底測量時間 tb，取 tb 的時間均值，而 tN 則可相對短，這樣可節省時間，有利于縮短實驗周期。對于標記實驗設計來說，樣品中所含放射性強度的要求，是使其放射性計數率大于或等于本底計數的 10－20 倍。

3、進行非放射性的模擬實驗，把實驗全過程預演一遍

同位素標記實驗要求、仔細，稍有疏忽或考慮不周匆忙進行正式實驗，既容易導致實驗失敗，又會造成標記劑和其它實驗用品的浪費，還會增加放射性，增加實驗室本底水平，使實驗者接受不的輻射劑量，所以模擬實驗不可以檢查正式實驗中所用器材，藥品是否合格，又可以操作人員進行訓練，以正式實驗能順利進行。

產品供應：

提供小分子、抗體、納米粒子等材料的放射性標記（18f、99mtc、125l、68Ga）及其他動物代謝的評價（SPECT/PET）放射性同位素標記實驗（整套流程）

18f:氟-18同位素 Fluorine-18

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小編：wyf  04.15