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菌荚膜的鉴定对的分型和鉴别有至关重要的作用,荚膜是在生存过程中在细胞壁外面形成的粘液性物质,具有?;さ挚雇淌珊拖淖饔?,可增加的侵袭力。荚膜不易被普通染色法染色,需经染色法染色后才能着色,易于观察,荚膜染色液(Hiss法)又称硫酸铜染色液,经该染色液染色后,荚膜被染成蓝紫色,被染成深蓝色。
用途:用于菌体荚膜的染色。
操作步骤
1.涂片:在洁净无油腻的玻片中央放一小滴蒸馏水(或用接种环挑1-2滴水),用无菌的接种环挑取少量菌种与水滴充分混匀,涂成极薄的菌膜,涂布面积约1cm2 。
2.干燥:涂片在室温下使其自然干燥,也可以小心地在酒精灯上高处微微加热,使水分蒸发,但切勿紧靠火焰或加热时间过长,以防标本烤枯而变形。
3.固定:手执玻片一端,有菌膜的一面朝上,通过微火三次(手指触摸反面不烫手为宜),待玻片冷却后,再加染色液。
4.染色:玻片置于玻片搁架上,加适量(以盖满菌膜为度)草酸铵结晶紫(或石炭酸复红染液)于菌膜部位,染色1-2min。
5.水洗:斜置载玻片,在自来水(或洗瓶)下用小股水流冲洗,直至洗下的水呈无色为止。
6.干燥:自然干燥或用吸水纸吸去涂片上的水,用吸水纸时切勿将菌体擦掉。
7.镜检:用高倍镜和油镜观察并绘形态并绘图于记录表中。
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