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全自動(dòng)環(huán)氧乙烷滅菌器的操作程序

閱讀:823        發(fā)布時(shí)間:2020-3-14

  操作程序

  (1) 根據(jù)試驗(yàn)要求,制備枯草桿菌黑色變種芽孢懸液和菌片。菌片放入雙層聚乙烯塑料袋內(nèi)密封包裝,每袋2片。每次試驗(yàn)用20袋。

  (2) 將滅菌器上、中、下3層,每層內(nèi)、中、外各設(shè)一點(diǎn),共設(shè)9點(diǎn)。每點(diǎn)物品中間布放1袋,共需18袋試驗(yàn)菌片。另將一袋(2片)菌片放置在室溫條件下作為陽(yáng)性對(duì)照。

  (3) 按使用說(shuō)明書(shū)所規(guī)定的環(huán)氧乙烷濃度、作用時(shí)間、柜內(nèi)的溫度和相對(duì)濕度,在滿載條件下進(jìn)行環(huán)氧乙烷滅菌處理。滿載用物品,隨滅菌器用途而定。處理完畢,取出菌片,分別移種于5 ml 營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中,置37℃ 培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),7d后觀察終結(jié)果(定性培養(yǎng)檢測(cè))。

  對(duì)難以判斷結(jié)果的營(yíng)養(yǎng)肉湯管,取其中0.2ml懸液接種營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板,用無(wú)菌L棒涂抹均勻,置37℃ 培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。48h后涂片染色,顯微鏡下觀察菌落形態(tài),或進(jìn)一步做其他試驗(yàn),判斷有無(wú)生長(zhǎng)或生長(zhǎng)的是否為試驗(yàn)菌。若為非試驗(yàn)菌,則應(yīng)重新進(jìn)行試驗(yàn)。

  (4) 測(cè)試中,應(yīng)同時(shí)設(shè)立定性和定量陽(yáng)性對(duì)照組與陰性對(duì)照組。

  (5) 定量陽(yáng)性對(duì)照組,以同批試驗(yàn)用菌片置室溫下,待消毒或滅菌試驗(yàn)組達(dá)規(guī)定作用時(shí)間后,立即將該菌片2片分別放入含5.0mlPBS試管中,各振敲打80次。取洗液按2.1.1.3 所示方法進(jìn)行活菌培養(yǎng)計(jì)數(shù)。

  (6) 定性陽(yáng)性對(duì)照組,以同批試驗(yàn)用菌片置室溫下,待滅菌試驗(yàn)組達(dá)規(guī)定作用時(shí)間后,立即將該菌片2 片,分別接種于5.0ml 營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基,放入溫箱中作定性培養(yǎng),觀察有細(xì)菌生長(zhǎng)情況。

  (7) 陰性對(duì)照組,以同批次試驗(yàn)用未染菌樣片2 片,分別接種于5.0ml 營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基,同時(shí)將未接種過(guò)的營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基放入培養(yǎng)箱中作定性培養(yǎng),觀察有無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)。

  (8) 試驗(yàn)重復(fù)5 次。

  (9)在5次試驗(yàn)中,每次試驗(yàn)中的陽(yáng)性對(duì)照菌片,回收菌量均應(yīng)在5×10cfu/片~5×10cfu/片;定性陽(yáng)性對(duì)照組,細(xì)菌生長(zhǎng)良好;陰性對(duì)照應(yīng)無(wú)菌生長(zhǎng)。陽(yáng)性或陰性對(duì)照若有不符合上述要求的結(jié)果,試驗(yàn)作廢,重新進(jìn)行。

  評(píng)價(jià)規(guī)定

  在5 次滅菌試驗(yàn)中,每次試驗(yàn)中的定量陽(yáng)性對(duì)照組,檢測(cè)回收菌量均達(dá)5 × 10cfu/ 片~5 × 10cfu/ 片;定性陽(yáng)性對(duì)照組,細(xì)菌生長(zhǎng)良好。陰性對(duì)照應(yīng)無(wú)菌生長(zhǎng)。所有試驗(yàn)菌片全部無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)時(shí),可判為滅菌合格。

  注意事項(xiàng)

  (1) 溫度和相對(duì)濕度對(duì)環(huán)氧乙烷氣體殺菌效果影響較大,故應(yīng)嚴(yán)格控制試驗(yàn)中的有關(guān)條件。

  (2) 環(huán)氧乙烷液體可溶解聚乙烯、聚氯乙烯等,不可將其液體滴落于此類物品上。環(huán)氧乙烷不論液體或氣體,均可損壞賽璐璐制品,試驗(yàn)時(shí)應(yīng)予注意。

  (3) 環(huán)氧乙烷易燃易爆,操作現(xiàn)場(chǎng)應(yīng)采取防火防爆措施,不得有明火作業(yè)及電火花發(fā)生。

  (4)吸入過(guò)多環(huán)氧乙烷氣體,可引起頭痛,嘔吐等中毒癥狀,嚴(yán)重者可致肺水腫等。工作環(huán)境中應(yīng)有良好的通風(fēng)。在每日8h 工作中,環(huán)氧乙烷濃度應(yīng)不超過(guò)1.82mg/m3 (1ppm),15min 工作中暴露濃度不超過(guò)9.1mg/m3(5.0ppm)。如出現(xiàn)中毒癥狀,需迅速離開(kāi)現(xiàn)場(chǎng)。輕者呼吸新鮮空氣,直到癥狀消除;重者應(yīng)及時(shí)送醫(yī)院治療。

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