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鏈霉親和素磁珠將高質(zhì)量的鏈霉親和素共價(jià)偶聯(lián)在超順磁性納米微球表面,可特異性地與生物素化分子的蛋白或核酸結(jié)合，從而方便快速完成免疫沉淀(Immunoprecipitation, IP)、Pull down 或生物素標(biāo)記蛋白或核酸的純化。并可以借助磁力架等磁分離設(shè)備非常便捷地應(yīng)用于相關(guān)實(shí)驗(yàn)。

產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)

1.具有高效的蛋白結(jié)合能力。

2.超低非特異性吸附的性能。

3.配合磁力架操作省時(shí)、簡(jiǎn)便、溫和。

4.產(chǎn)品穩(wěn)定性高。

訂購(gòu)信息

常溫運(yùn)輸。4℃保存，有效期 24 個(gè)月。

技術(shù)參數(shù)

免疫沉淀

【注】：為保證磁珠均勻分布，使用前通過(guò)反復(fù)顛倒或輕微渦旋混勻瓶中磁珠。

1.將 25µL(0.25 mg)的鏈霉親和素磁 珠加入 1.5 mL 離心管中。

2.向磁珠中加入 500 µL 預(yù)冷 PBS，輕柔混勻。

3.將離心管放入磁力架中收集磁珠到離心管的一邊。去除上清。

4.向離心管中加入 200-500 µL IP Lysis/Wash Buffer。顛倒離心管數(shù)次或輕微渦旋混勻 1min。用磁力架收集磁珠。去除上清，待用。

5.將制備好的蛋白樣品與生物素標(biāo)記抗體混勻，室溫下孵育 1-2 h 或 4°C 過(guò)夜。

6.將上述混合物加入預(yù)洗好的磁珠中混勻，室溫下孵育 1-2 h 或 4°C 過(guò)夜。

7.用磁力架收集磁珠，除去未結(jié)合的樣品，保存以備分析。

8.向離心管中加入 500 µL IP Lysis/Wash Buffer，輕柔混勻。收集磁珠，棄上清。再重復(fù)洗兩次。

9.變性洗脫：向離心管中加入 80-100 µL SDS-PAGE Sample Loading Buffer（1×），將樣品置于 100℃水浴或者金屬浴中加熱 10 min。通過(guò)磁力架分離磁珠，保留含有目的抗原的上清。

【注】：如需保持蛋白活性，也可采用以下洗脫方式。

低 pH 洗脫：向離心管中加入 100 µL Elution Buffer。保持混勻在室溫下孵育離心管 5-10 min。通過(guò)磁力分離磁珠，保留含有目的抗原的上清。每 100 µL 洗出液中加入 20 µL Neutralization Buffer 來(lái)中和低 pH。

注意事項(xiàng)

1.本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用，不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。

2.請(qǐng)勿高速離心、干燥或冷凍磁珠，這些操作會(huì)導(dǎo)致磁珠聚集而降低結(jié)合能力。

3.IP 實(shí)驗(yàn)中不同類(lèi)型的抗體與抗原結(jié)合的親和性是有區(qū)別的，抗體與抗原結(jié)合還會(huì)受到 IP Lysis/WashBuffer 的影響，因此，如使用本實(shí)驗(yàn)步驟不能獲得最佳的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可自行優(yōu)化操作細(xì)節(jié)或者篩選及配制緩沖液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，推薦使用李記生物的相關(guān)產(chǎn)品，參照相關(guān)產(chǎn)品推薦。

4.微球使用前應(yīng)充分振蕩均勻。微球應(yīng)保存在儲(chǔ)存溶液中，防止干燥。

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