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液相色譜柱的使用及注意事項(xiàng)
液相色譜柱的使用：
液相色譜柱在使用前，進(jìn)行柱的性能測試，并將結(jié)果保存起來，作為今后評價(jià)柱性能變化的參考。但要注意：柱性能可能由于所使用的樣品、液相色譜柱、柱溫等條件的差異而有所不同；另外，在做柱性能測試時(shí)是按照液相色譜柱出廠報(bào)告中的條件進(jìn)行(出廠測試所使用的條件是*條件)，只有這樣，測得的結(jié)果才有可比性。
液相色譜柱樣品的前處理：
1使用液相色譜柱溶解樣品。
2使用予處理柱除去樣品中的強(qiáng)極性或與柱填料產(chǎn)生不可逆吸附的雜質(zhì)。4.2.1.3使用0.45μm的過濾膜過濾除去微粒雜質(zhì)。
3.液相色譜柱的配制：液相色譜是樣品組分在柱填料與液相色譜柱之間質(zhì)量交換而達(dá)到分離的目的，因此要求液相色譜柱具備以下的特點(diǎn)：
4.液相色譜柱對樣品具有一定的溶解能力，保證樣品組分不會(huì)沉淀在柱中(或長時(shí)間保留在柱中)。4.2.2.2液相色譜柱具有一定惰性，與樣品不產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng)(特殊情況除外)。
5.液相色譜柱的黏度要盡量小，以便在使用較長的分析柱時(shí)能得到好的分離效果；同時(shí)降低柱壓降，延長液體泵的使用壽命(可運(yùn)用提高溫度的方法降低液相色譜柱的黏度)。
6.液相色譜柱的物化性質(zhì)要與使用的檢測器相適應(yīng)。如使用UV檢測器，使用對紫外吸收較低的溶劑配制。
7.液相色譜柱沸點(diǎn)不要太低，否則容易產(chǎn)生氣泡，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)無法進(jìn)行。
在液相色譜柱配制好后，一定要進(jìn)行脫氣。除去溶解在液相色譜柱中的微量氣體既有利于檢測，還可以防止液相色譜柱中的微量氧與樣品發(fā)生作用。
8.液相色譜柱流速的選擇：因柱效是柱中液相色譜柱線性流速的函數(shù)，使用不同的流速可得到不同的柱效。對于一根特定的液相色譜柱，要追求*柱效，使用*流速。對內(nèi)徑為4.6mm的液相色譜柱，流速一般選擇1ml／min，對于內(nèi)徑為4.0mm柱，流速0.8ml／min為佳。當(dāng)選用*流速時(shí)，分析時(shí)間可能延長?？刹捎酶淖円合嗌V柱的洗滌強(qiáng)度的方法以縮短分析時(shí)間(如使用反相柱時(shí)，可適當(dāng)增加甲醇或乙腈的含量)。
液相色譜柱使用注意事項(xiàng)：
a．由于甲醇廉價(jià)，對于反相柱推薦使用甲醇體系(必須使用乙腈的場合除外)。
b．對于正相柱推薦使用沸程為30-60℃的石油醚或提純后的己烷作液相色譜柱，沒有提純的己烷不得使用。用水使用超純水(電阻率大于18兆歐)，去離子水及雙蒸水中含有酚類雜質(zhì)，有可能影響分析結(jié)果。
c．含水液相色譜柱在實(shí)驗(yàn)前配制，尤其是夏天使用緩沖溶液作為液相色譜柱不要過夜。加入*，防止細(xì)菌生長。
d．液相色譜柱要求使用0.45μm濾膜過濾，除去微粒雜質(zhì)。
e．使用HPLC級溶劑配制液相色譜柱，使用合適的液相色譜柱可延長液相色譜柱的使用壽命，提高柱性能
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