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elisa檢測(cè)試劑盒的測(cè)定方法
閱讀：1848發(fā)布時(shí)間：2019-1-14
elisa檢測(cè)試劑盒的測(cè)定方法
所以任何的診斷試劑離不開的原料，如抗原抗體，酶等。以前用于免疫測(cè)定的抗原通常為各種純化抗原，而抗體則為純化抗原免疫動(dòng)物后獲得的多克隆抗體和使用雜交瘤技術(shù)得到的單克隆抗體，elisa檢測(cè)試劑盒而抗原或抗體的標(biāo)記物如酶標(biāo)結(jié)合物則通過各種化學(xué)合成方法制備。近年來，隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，使用基因工程方法制備各種特殊的抗原或抗體及其酶結(jié)合物等免疫測(cè)定試劑幾成為現(xiàn)實(shí)的新一代試劑，各種新型使用也不斷出現(xiàn)。
elisa檢測(cè)試劑盒應(yīng)用定性夾心免疫檢測(cè)技術(shù)，用合成的hev多肽抗原包被微孔板板條，這些多肽是中國(guó)型hev毒株核心氨基酸序列中抗原性很強(qiáng)的肽段，分別來自于該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3。將樣品或標(biāo)準(zhǔn)品加入孔中并孵育，如果其中存在hev igm抗體，這些抗體就會(huì)與hev 的多肽抗原結(jié)合，并固定在上面，洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人igm-hrp（辣根過氧化物酶）酶結(jié)合物，經(jīng)第二次孵育后，酶結(jié)合物就會(huì)與次孵育結(jié)合上的hev igm抗體相結(jié)合，洗板除去未結(jié)合的酶結(jié)合物，加入tmb底物溶液，在第三次孵育時(shí)會(huì)發(fā)生酶-底物反應(yīng)，elisa檢測(cè)試劑盒只有那些含有hev igm抗體和酶結(jié)合物所形成的復(fù)合物的孔才會(huì)發(fā)生顏色變化，加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應(yīng)，
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