激光共聚焦顯微鏡使用時(shí)需要注意哪些地方?
閱讀:987 發(fā)布時(shí)間:2023-2-27
激光共聚焦掃描顯微技術(shù)是一種高分辨率的顯微成像技術(shù)。普通的熒光光學(xué)顯微鏡在對(duì)較厚的標(biāo)本(例如細(xì)胞)進(jìn)行觀察時(shí),來(lái)自觀察點(diǎn)鄰近區(qū)域的熒光會(huì)對(duì)結(jié)構(gòu)的分辨率形成較大的干擾。共聚焦顯微技術(shù)的關(guān)鍵點(diǎn)在于,每次只對(duì)空間上的一個(gè)點(diǎn)(焦點(diǎn))進(jìn)行成像,再通過(guò)計(jì)算機(jī)控制的一點(diǎn)一點(diǎn)的掃描形成標(biāo)本的二維或者三維圖象。在此過(guò)程中,來(lái)自焦點(diǎn)以外的光信號(hào)不會(huì)對(duì)圖像形成干擾,從而大大提高了顯微圖象的清晰度和細(xì)節(jié)分辨能力。
激光共聚焦顯微鏡是在熒光顯微鏡成像基礎(chǔ)上加裝了激光掃描裝置,利用計(jì)算機(jī)進(jìn)行圖象處理, 使用紫外或可見光激發(fā)熒光探針, 從而得到細(xì)胞或組織內(nèi)部微細(xì)結(jié)構(gòu)的熒光圖象。在傳統(tǒng)光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)上,激光掃描共聚焦顯微鏡用激光作為光源,采用共軛聚焦原理和裝置,并利用計(jì)算機(jī)對(duì)所觀察的對(duì)象進(jìn)行數(shù)字圖像處理觀察、分析和輸出。其特點(diǎn)是可以對(duì)樣品進(jìn)行斷層掃描和成像,進(jìn)行無(wú)損傷觀察和分析細(xì)胞的三維空間結(jié)構(gòu)。
使用注意事項(xiàng):
1、嚴(yán)格按照使用規(guī)則操作,不要隨意更改操作程序。激光共聚焦顯微鏡中的激光發(fā)射管具有有限的使用壽命并且昂貴。因此,在操作和使用過(guò)程中,重要的是在開關(guān)的啟動(dòng)順序和掃描過(guò)程中保護(hù)激光管。
2、小心不要接觸中等功率和高功率的激光輻射。請(qǐng)?zhí)貏e注意不要使用激光束甚至樣品:不要在共焦顯微鏡附近存放或使用易燃或易爆物質(zhì),液體或氣體:布或紙等易燃材料不應(yīng)放在光路中。
3、啟動(dòng)或更改激光功率后,激光光源需要大約20分鐘才能穩(wěn)定下來(lái)。當(dāng)激光共聚焦顯微鏡系統(tǒng)關(guān)閉時(shí),首先關(guān)閉計(jì)算機(jī),然后在關(guān)閉氬氣激光器時(shí)關(guān)閉系統(tǒng)開關(guān)。
4、掃描的圖像存儲(chǔ)在計(jì)算機(jī)中以供進(jìn)一步處理。由于計(jì)算機(jī)的硬盤是有限的,它應(yīng)該及時(shí)存儲(chǔ)在用戶的軟盤上,但要注意任何病毒浸漬的激光激光共聚焦顯微鏡系統(tǒng)。使用前,必須嚴(yán)格檢查軟盤是否攜帶病毒。