细菌通用PCR试剂盒

Bacteria

产品及特点

细菌（Bacteria）广义的细菌即为原核生物是指一大类细胞核无核膜包裹， 只存在称作拟核区（nuclear region)（或拟核）的裸露 DNA 的原始单细胞生 物，包括真细菌（eubacteria）和古生菌（archaea）两大类群。人们通常所说 的即为狭义的细菌，狭义的细菌为原核微生物的一类，是一类形状细短，结构 简单，多以二分裂方式进行繁殖的原核生物，是在自然界分布广、个体数量 多的有机体，是大自然物质循环的主要参与者。本产品是根据 PCR 原理开发 的细菌通用检测试剂盒，它具有下列特点： 

1. 即开即用，用户只需要提供 DNA 模板。

2. 引物经过精心优化，专一性强，只扩增细菌，与其他病原没有交叉反应。

3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。

4. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。

5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次，但只能用于科研。 

细菌通用PCR试剂盒规格及成分

运输及保存 低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其 他试剂。  

自备试剂 样品 DNA。

使用方法 一、样品 DNA 的制备

1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数核酸提取 试剂盒兼容。

2. 如果有 N 个样品，则需要做 N+2 个提取，包括一个样品制备阳性对照和一 个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水（取决于试剂盒要求 的样品起始量）中加 10μL 芽孢杆菌通用 PCR 阳性对照的 10000 倍稀释 液而得，样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后后得到模板 DNA 放 冰上待用。 

二、设置 PCR 反应（40μL 体系）

3. 对 N+2 个样品，在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照，故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分： 

4. 按下表设置 PCR 反应：

三、电泳检测

5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳 性对照必须有 551bp 大小的条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实 验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。