（1）吸光度太高，一方面可能偏离朗伯比尔定律，吸光度变化不再呈线性关系；另一方面会导致吸光度变化不灵敏。因此，吸光度不宜太高。如果可以，尽量控制在1以下。
（2）构成本底吸光度是样品提取液含有在该波长产生强烈光吸收的其它物质，或者在测定光吸收减少速率的反应中，人为添加的底物在该波长下造成的光吸收。
（3）如果是前者造成的，那么可以通过用对照再次调零，把本底光吸收消除。
（4）如果是后者，那么只能接受?；蛘呖头?，看看能否减少底物浓度。不过，大家知道，对于酶来说，底物浓度通常要求≥10Km。
至于吸光度超过分光光度计测量范围，通常是两种情况，紫外应该用石英比色皿，错用了玻璃比色皿；或者比色皿不透光一面对着光源。其它情况还包括比色皿太脏，或者提取液本身颜色太深等。