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固相萃取儀原理

閱讀:1503        發(fā)布時(shí)間:2017-12-6
固相萃取(Solid Phase Extraction,簡(jiǎn)稱(chēng)SPE)是從八十年代中期開(kāi)始發(fā)展起來(lái)的一項(xiàng)樣品前處理技術(shù)。由液固萃取和液相色譜技術(shù)相結(jié)合發(fā)展而來(lái)。主要用于樣品的分離,凈化和富集。主要目的在于降低樣品基質(zhì)干擾,提高檢測(cè)靈敏度。SPE技術(shù)基于液-固相色譜理論,采用選擇性吸附、選擇性洗脫的方式對(duì)樣品進(jìn)行富集、分離、凈化,是一種包括液相和固相的物理萃取過(guò)程;也可以將其近似地看作一種簡(jiǎn)單的色譜過(guò)程。SPE是利用選擇性吸附與選擇性洗脫的液相色譜法分離原理。較常用的方法是使液體樣品溶液通過(guò)吸附劑,保留其中被測(cè)物質(zhì),再選用適當(dāng)強(qiáng)度溶劑沖去雜質(zhì),然后用少量溶劑迅速洗脫被測(cè)物質(zhì),從而達(dá)到快速分離凈化與濃縮的目的。也可選擇性吸附干擾雜質(zhì),而讓被測(cè)物質(zhì)流出;或同時(shí)吸附雜質(zhì)和被測(cè)物質(zhì),再使用合適的溶劑選擇性洗脫被測(cè)物質(zhì)。操作步驟編輯針對(duì)填料保留機(jī)理的不同(填料保留目標(biāo)化合物或保留雜質(zhì)),操作稍有不同。固相萃取操作一般有四步(見(jiàn)圖1):1.填料保留目標(biāo)化合物l活化----除去小柱內(nèi)的雜質(zhì)并創(chuàng)造一定的溶劑環(huán)境。l上樣----將樣品用一定的溶劑溶解,轉(zhuǎn)移入柱并使組分保留在柱上。l淋洗----zui大程度除去干擾物。l洗脫----用小體積的溶劑將被測(cè)物質(zhì)洗脫下來(lái)并收集。2.填料保留雜質(zhì)固相萃取操作一般有三步(見(jiàn)圖2):l活化--除去柱子內(nèi)的雜質(zhì)并創(chuàng)造一定的溶劑環(huán)境。l上樣--將樣品轉(zhuǎn)移入柱,此時(shí)大部分目標(biāo)化合物會(huì)隨樣品基液流出,雜質(zhì)被保留在柱上,l故此步驟要開(kāi)始收集l洗脫---用小體積的溶劑將組分淋洗下來(lái)并收集,合并收集液。此種情況多用于食品或農(nóng)殘分析中去除色素。特點(diǎn)編輯相對(duì)于傳統(tǒng)的液液萃取法和蛋白沉淀法,固相萃取具有*的優(yōu)勢(shì),具體如下:凈化方法: LLE(液液萃?。﹥?yōu)點(diǎn): 無(wú)需特殊裝置缺點(diǎn):1.操作繁瑣,費(fèi)時(shí)2.需要耗費(fèi)大量的有機(jī)溶劑,導(dǎo)致高成本和對(duì)環(huán)境的污染3.難以從水中提取高水溶性物質(zhì)凈化方法:PPT(蛋白沉淀)優(yōu)點(diǎn): 操作簡(jiǎn)單,無(wú)需特殊裝置缺點(diǎn):1.非特異性的沉淀反應(yīng)可能使微量的分析物隨著基質(zhì)蛋白質(zhì)共同沉淀而損失。2.凈化效果較弱,檢測(cè)靈敏度和可靠性低。SPE(固相萃取)優(yōu)點(diǎn):1可同時(shí)完成樣品富集與凈化,大大提高檢測(cè)靈敏度2比液液萃取更快,更節(jié)省溶劑, 可自動(dòng)化批量處理3重現(xiàn)性好缺點(diǎn):1.使用進(jìn)口固相萃取小柱成本較高2.需要專(zhuān)業(yè)人員協(xié)助進(jìn)行方法開(kāi)發(fā)簡(jiǎn)要過(guò)程編輯1.一個(gè)樣品包括分離物和干擾物通過(guò)吸附劑;2.吸附劑選擇性的保留分離物和一些干擾物,其他干擾物通過(guò)吸附劑;3.用適當(dāng)?shù)娜軇┝芟次絼瓜惹氨A舻母蓴_物選擇性的淋洗掉,分離物保留在吸附劑床上;4.純化、濃縮的分離物從吸附劑上淋洗下來(lái)。

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