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液相色譜柱正確使用方法

閱讀:1517        發(fā)布時間:2016-8-30

液相色譜柱正確使用方法

一、樣品方面

  1.除去微粒及雜質(zhì)

  2.了解樣品在流動相中的溶解度

  如溶樣品的溶劑不是流動相,一定要用流動相試溶解度,防止其在流動相中析出

  3.了解樣品與色譜柱的基質(zhì)/填料是否有相互作用

  二、流動相方面

  1.除去微粒

  純度的要求:超純水,梯度實驗時水中有機(jī)雜質(zhì)含量要低;緩沖液的PH值,在填料的允許范圍內(nèi);緩沖液()的濃度;有機(jī)溶劑:色譜純,雜質(zhì)含量盡量低,并與填料相匹配

  2.流動相對樣品的溶解度

  有機(jī)溶劑或水的比例

  三、色譜柱的清洗

  對所做的樣品要有充分的了解,用對該樣品洗脫能力zui強(qiáng)的流動相清洗

  硅膠柱的一般方法是先用甲醇洗去極性雜質(zhì),然后用干燥的二氯甲烷、正庚烷100~200ml依次活化

  鍵合相柱(烷基)的一般方法是用20倍體積的甲醇-*仿-甲醇-水依次沖洗

  (記?。好糠N色譜柱可能性有特定的方法,一定要先看其使用說明!)

  四、色譜柱的存放

  存放前的處理要除去雜質(zhì)、緩沖鹽

  合適的存放溶劑

  避免色譜柱床的干涸

  避免機(jī)械震動

  防止細(xì)菌生長

  注意存放的溫度

 

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