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免疫和肿瘤胞测定及分选中的应用

时间:2016-8-8阅读:1288
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免疫和肿瘤胞测定及分选中的应用

   细胞分选是FCM技术一项特殊的功能,在免疫研究及临床应用上占有重要地位。它的主要作用一是分选,二是鉴定,而分选又必须同鉴定结合进行。只要有相应的荧光标记,就可以分离出任何所需要的细胞群体,尤其是含量但对鉴定又非常主要的细胞,纯度可达95%以上。

细胞周期中静止期细胞的分离R.Schwarting等制备一株抗核抗原的单克隆抗体Ki-67,它同细胞周期中G1、S、G2M期 所有具增殖性的细胞结合,但不同G0期细胞反应,这样就可以用分选技术把静止期细胞分离出来。

人外周血嗜碱细胞的分离  IgE介导嗜碱细胞释放组织胺和其他介质,是介导I型超敏反应的特定标志,但白细胞中的嗜碱细胞浓度极低,阻碍了这一研究。用抗鼠IgE单克隆抗体同FITC结合物染色技术,即可通过分选方法把嗜碱细胞分离出来,2小时可收集细胞4×105,活存88%以上。

外周血中变异红细胞的鉴定  这是分选技术同显微镜结合的鉴定、监测手段。它可成功地来定量在正常个体血细胞内检查出含突变的血红蛋白的红细胞,也可以监督暴露于致突变原的环境工作人员含突变红细胞个体的背景,检出敏感性可达3×10-5细胞。

从母体循环中分离出胎儿细胞  其原理是用YDNA探针,HLA-A特异单克隆抗体,Rh因子血清等染色及胞/核比例,细胞大小,核大小及光散射等特点在母体中找出非母体细胞标记,即可鉴定出胎儿细胞。这种技术的推广应用,可以减少母体怀孕期间羊膜穿刺或滋氧层穿刺带来的危险。

分选技术也存在着某些技术不足,如分离速度、产量受限;分选中由于管道、滤材等因素使得大细胞或有粘附性细胞受到限制性的选择。目前,细胞标记药品及方法,也会不同程度影响细胞质量。随着新技术的应用,这些问题会得到满意地解决。

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