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应用领域 | 医疗卫生,生物产业 |
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肌细胞分离概述从灌注心脏中分离存活的肌细胞是许多光学和/或电生理学实验或*培养中的初和关键的步骤。
该系统可用于恒压或恒流Langendorff制剂。
如果实验者决定使用更常见的恒定流量隔离,则使用歧管来选择合适的溶液,然后将其泵 送通过气泡捕集器并进入心脏。
先,使用晶体溶液(Kreb's或Tyrode's)去除血细胞并稳定制剂,然后使用含有EGTA 的溶液去除残留的钙。
然后将含有胶原酶和有时其他消化酶的溶液再循环通过制剂直至心脏变得松弛,表明将细胞保 持在一起的细胞间基质溶解。
然后将部分消化的组织切成小块并置于振荡浴中并进行连续解离处理直至释放出单个肌 细胞。
该方案可能需要几次更换溶液以选择具有产量和活力的肌细胞部分,后者通过在台盼蓝或其他活体染料染 色存在下使用显微镜检查来确定。
为了增加活力,孵育培养基的钙浓度的阶跃变化用于在使用之前将肌细胞恢复到正 常的离子环境。
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