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酶標儀原理
酶標儀：即酶聯(lián)免疫檢測儀（ELISA Reader）是酶聯(lián)免疫吸附試驗的儀器。可簡單地分為半自動和全自動2大類，但其工作原理基本上都是一致的，其核心都是一個比色計，即用比色法來分析抗原或抗體的含量。ELISA測定一般要求測試液的終體積在250ul以下，用一般光電比色計無法完成測試，因此對酶標儀中的光電比色計有特殊要求。
酶聯(lián)免疫吸附試驗方法
酶標朕免疫吸附試驗方法簡稱酶標法，是標記技術(shù)中的一種，是從熒光抗體技術(shù)，同位素免疫技術(shù)發(fā)展而來的一種敏感，特異，快速并且能自動化的現(xiàn)代技術(shù)。
酶標法的基本原理是將抗原或抗體與酶用膠聯(lián)劑結(jié)合為酶標抗原或抗體，此酶標抗原或抗體可與固相載體上或組織內(nèi)相應(yīng)抗原或抗體發(fā)生特異反應(yīng)，并牢固地結(jié)合形成仍保持活性的免疫復(fù)合物。當(dāng)加入相應(yīng)底物時，底物被酶催化而呈現(xiàn)出相應(yīng)反應(yīng)顏色。顏色深淺與相應(yīng)抗原或抗體含量成正比。
由于此技術(shù)是建立在抗原-抗體反應(yīng)和酶的催化作用的基礎(chǔ)上，因此，具有高度的靈敏性和特異性，是一種極富生命力的免疫學(xué)試驗技術(shù)。
酶標儀的工作原理及結(jié)構(gòu)
酶標儀實際上就是一臺變相的光電比色計或分光光度計，其基本工作原理與主要結(jié)構(gòu)和光電比色計基本相同。
光源燈發(fā)出的光波經(jīng)過濾光片或單色器變成一束單色光，進入塑料微孔極中的待測標本。該單色光一部分被標本吸收，另一部分則透過標本照射到光電檢測器上，光電檢測器將這一待測標本不同而強弱不同的光信號轉(zhuǎn)換成相應(yīng)的電信號。電信號經(jīng)前置放大，對數(shù)放大，模數(shù)轉(zhuǎn)換等信號處理后送入微處理器進行數(shù)據(jù)處理和計算，后由顯示器和打印機顯示結(jié)果。
微處理機還通過控制電路控制機械驅(qū)動機構(gòu)X方向和Y方向的運動來移動微孔板，從而實現(xiàn)自動進樣檢測過程。而另一些酶標儀則是采用手工移動微孔板進行檢測，因此省去了X，Y方向的機械驅(qū)動機構(gòu)和控制電路，從而使儀器更小巧，結(jié)構(gòu)也更簡單。
微孔板是一種經(jīng)事先包理于放置待測樣本的透明塑料板，板上有多排大小均勻一致的小孔，孔內(nèi)都包埋著相應(yīng)的抗原或抗體，微孔板上每個小孔可盛放零點幾毫升的溶液。其常見規(guī)格有40孔板，55孔板，96孔板等多種，不同的儀器選用不同規(guī)格的孔板，對其可進行一孔一孔地檢測或一排一排地檢測。
酶標儀所用的單色光既可通過相干濾光片來獲得，也可用分光光度計相同的單色器來得到。在使用濾光片作濾波裝置時與普通比色計一樣，濾光片即可放在微孔板的前面，也可放在微孔板的后面，其效果是相同的。光源燈發(fā)出的光經(jīng)聚光鏡，光欄后到達反射鏡，經(jīng)反射鏡作90o反射后垂直通過比色溶液，然后再經(jīng)濾光片送到光電管。
酶標儀和普通的光電比色計有以下幾點差異：
(l)盛裝待測比色液的容器不再使用比色皿，而是使用塑料微孔板。微孔板常用透明的聚乙烯材料制成，對抗原抗體有較強的吸附作用，故用它作為固相載體。
(2)由于盛樣本的塑料微孔板是多排多孔的，光線只能垂直穿過，因此酶標儀的光來都是垂直通過待測溶液和微孔板的，光束既可是從上到下，也可以是從下到上穿過比色液。
(3)酶標儀通常不僅用A，有時也使用光密度OD來表示吸光度。
酶標儀可分為單通道和多通道2種類型，單通道又有自動和手動2種之分。自動型的儀器有X，Y方向的機械驅(qū)動機構(gòu)，可將微孔板L的小孔一個個依次送入光束下面測試，手動型則靠手工移動微孔板來進行測量。
在單通道酶標儀的基礎(chǔ)上又發(fā)展了多通道酶標僅，此類酶標僅一般都是自動化型的。它設(shè)有多個光束和多個光電檢測器，如12個通道的儀器設(shè)有12條光束或12個光，12個檢測器和12個放大器，在X方向的機械驅(qū)動裝置的作用下，樣品12個為一排被檢測。多通道酶標儀的檢測速度快，但其結(jié)構(gòu)較復(fù)雜價格也較高。