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流式檢測 T 細胞增殖的技巧
集中于 T 細胞的許多基礎(chǔ)和臨床免疫研究包括增殖測定，都是為了確定 T 細胞是否能夠在不同的體外或體內(nèi)條件下增殖。流式細胞儀術(shù)是測量 T 細胞增殖的理想方法，現(xiàn)在有一套染色產(chǎn)品，可以在現(xiàn)有的流式細胞儀染色板中加入增殖染料。與所有流式細胞術(shù)染色步驟一樣，一定要做一個預(yù)實驗確定染色試劑的用量和確定采集的細胞數(shù)，在下一個 T 細胞實驗確定使用其中的一個染色方案來檢測細胞的增殖 。
胞內(nèi)熒光染色：
羧基熒光素二乙酸酯琥珀酰亞胺酯（CFSE）或類似的熒光染料是可以進入活細胞內(nèi)的。在增殖期間，隨著細胞分裂熒光染料的濃度也隨之稀釋，并且可以在流式細胞檢測分析時作為離散峰測量多次細胞分裂。當您在預(yù)實驗中檢測這些染料時，需確保這些增殖染料不影響細胞活性或形態(tài)。
DNA 合成：
細胞增殖還可以通過胸苷合成類似物 5-溴-2'-脫氧尿苷（BrdU）檢測細胞周期 S 期的 DNA 合成量來測定。通常在細胞培養(yǎng)中添加 BrdU 以確定體外增殖，并且使用抗 BrdU 的二抗與細胞內(nèi)因子結(jié)合來測量 BrdU 摻入。
以上 T 細胞增殖方法的可能有一種更適合您正在進行的實驗，或者可用于您的流式細胞儀。每種方法都相對容易應(yīng)用到您的下一個實驗，并可以根據(jù)該檢測更好地了解細胞功能。